Результаты преимплатационного генетического скрининга эмбрионов у супружеских пар с фрагментацией ДНК сперматозоидов
Цель исследования. Определить частоту анеуплоидий (моносомий, трисомий, дисомий, нуллисомий) по всем хромосомам, а также делеций и амплификаций ДНК у эмбрионов в парах с повышенным и нормальным уровнем фрагментации ДНК ядра сперматозоидов. Материал и методы. 170 пар прошли программу преимплатационного генетического скрининга (ПГС) методом сравнительной геномной гибридизации на чипах (aCGH). Для каждой пары была произведена оценка концентрации, подвижности и морфологии сперматозоидов согласно нормам ВОЗ 2010, а также определен уровень фрагментации ДНК ядра сперматозоидов методом TUNEL. Результаты. Выявлена зависимость между уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов отца и частотой получения эмбрионов с нормальным кариотипом. При повышенном уровне фрагментации ДНК данный показатель составляет 47,96% против 66,17% при нормальном уровне (p<0,02). Также было установлено существенное увеличение встречаемости делеций и амплификаций в ДНК эмбрионов при повышенном уровне фрагментации ДНК сперматозоидов отца (35,89% против 5,39% при нормальном уровне фрагментации, p<0,001). На аномалии количества хромосом фрагментация не оказывает статистически значимого влияния. Заключение. Проведенное исследование продемонстрировало корреляцию между уровнем фрагментации ДНК сперматозоидов отца и частотой структурных аномалий в кариотипе у эмбрионов.Киселева Ю.Ю., Азова М.М., Кодылева Т.А., Ушакова И.В., Кириллова А.О., Екимов А.Н., Ракитько А.С., Володяева Т.O., Мишиева Н.Г., Абубакиров A.Н.
Ключевые слова
фрагментация ДНК
преимплантационный генетический скрининг
анеуплоидии
сравнительная геномная гибридизация на чипах
TUNEL
Список литературы
1. Руководство ВОЗ по лабораторному исследованию эякулята человека и взаимодействия сперматозоидов с цервикальной слизью. Пер. с англ. 4-е изд. М.: МедПресс; 2001.
2. Kaarouch I., Bouamoud N., Louanjli N., Madkour A., Copin H., Benkhalifa M., Sefrioui O. Impact of sperm genome decay on Day-3 embryo chromosomal abnormalities from advanced-maternal-age patients. Mol. Reprod. Dev. 2015; 82(10): 809-19.
3. Belloc S., Benkhalifa M., Cohen-Bacrie M., Dalleac A., Chahine H., Amar E., Zini A. Which isolated sperm abnormality is most related to sperm DNA damage in men presenting for infertility evaluation. J. Assist. Reprod. Genet. 2014; 31(5): 527-32.
4. Robinson L., Gallos I.D., Conner S.J., Rajkhowa M., Miller D., Lewis S. et al. The effect of sperm DNA fragmentation on miscarriage rates: a systematic review and meta-analysis. Hum. Reprod. 2012; 27(10): 2908-17. doi: 10.1093/humrep/des261.
5. Enciso M., Alfarawati S., Wells D. Increased numbers of DNA-damaged spermatozoa in samples presenting an elevated rate of numerical chromosome abnormalities. Hum. Reprod. 2013; 28(6): 1707-15. doi: 10.1093/humrep/det077.
6. Evgeni E., Charalabopoulos K., Asimakopoulos B. Human sperm DNA fragmentation and its correlation with conventional semen parameters. J. Reprod. Infertil. 2014; 15(1): 2-14.
7. Gandini L., Lombardo F., Paoli D., Caruso F., Eleuteri P., Leter G. et al. Full-term pregnancies achieved with ICSI despite high levels of sperm chromatin damage. Hum. Reprod. 2004; 19(6): 1409-17.
8. Руднева С.А., Брагина Е.Е., Арифулин Е.А., Сорокина Т.М., Шилейко Л.В., Ермолаева С.А., Курило Л.Ф., Черных В.Б. Фрагментация ДНК в сперматозоидах и ее взаимосвязь с нарушением сперматогенеза. Андрология и генитальная хирургия. 2014; 4: 26-33.
9. Goldberg L., Kercheval A., Lee K. t‐statistics for weighted means in credit risk modeling. J. Risk Finance. 2005; 6(4): 349-65.
10. R Core Team R: A language and environment for statistical computing. Vienna, Austria: R Foundation for Statistical Computing; 2016. Available at: https://www.R-project.org/
11. Mann H., Whitney D. On a test of whether one of two random variables is stochastically larger than the other. Ann. Math. Statist. 1947;18(1): 50-60.
12. Cohen-Bacrie P., Belloc S., Menezo Y.J., Clement P., Hamidi J., Benkhalifa M. Correlation between DNA damage and sperm parameters: a prospective study of 1,633 patients. Fertil. Steril. 2009; 91(5): 1801-5.
13. Belloc S., Hazout A., Zini A., Merviel P., Cabry R., Chahine H. et al. How to overcome male infertility after 40: Influence of paternal age on fertility. Maturitas. 2014; 78: 22-9.
14. Sakkas D., Alvarez J.G. Sperm DNA fragmentation: mechanisms of origin, impact on reproductive outcome, and analysis. Fertil. Steril. 2010; 93(4): 1027-36.
15. Benkhalifa M., Montjean D., Belloc S., Dalleac A., Ducasse M., Boyer P. et al. Emerging molecular methods for male infertility investigation. Expert Rev. Mol. Diagn. 2014; 14(1): 37-45.
16. World Health Organization. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. 5th ed. Geneva: World Health Organization; 2010.
Поступила 03.10.2016
Принята в печать 11.11.2016
Об авторах / Для корреспонденции
Киселева Юлия Юрьевна, эмбриолог ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, аспирант кафедры биологии и общей генетикимедицинского института ФГАОУ ВО РУДН. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 417-13-11. Е-mail: 79164171311@yandex.ru
Азова Мадина Мухамедовна, д.б.н., доцент, зав. кафедрой биологии и общей генетики медицинского института ФГАОУ ВО РУДН.
Адрес: 117198, Россия, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. Телефон: 8 (495) 434-53-00. E-mail: azovam@mail.ru
Кодылева Татьяна Александровна, эмбриолог 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. E-mail: t_kodyleva@oparina4.ru
Ушакова И.В., к.б.н., эмбриолог отделения репродукции ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (985) 928-92-87. E-mail: ir_ushakova@oparina4.ru
Кириллова Анастасия Олеговна, эмбриолог ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. Е-mail: a_kozyreva@oparina.ru
Екимов Алексей Николаевич, научный сотрудник ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. Е-mail: a_ekimov@oparina4.ru
Ракитько Александр Сергеевич, сотрудник кафедры теории вероятностей механико-математического факультета МГУ им. Ломоносова.
Адрес: 119991, Россия, Москва, ул. Ленинские горы, д. 1А. Телефон: 8 (910) 482-00-17. E-mail: rakitko@gmail.com
Володяева Татьяна Олеговна, м.н.м. ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (966) 325-53-05. Е-mail: tvolo90@mail.ru
Мишиева Нона Годовна, д.м.н., в.н.с. 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. E-mail: nondoc555@mail.ru
Абубакиров Айдар Назимович, к.м.н., руководитель 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. Е-mail: nondoc555@yahoo.com
Для цитирования: Киселева Ю.Ю., Азова М.М., Кодылева Т.А., Ушакова И.В., Кириллова А.О., Екимов А.Н., Ракитько А.С., Володяева Т.O., Мишиева Н.Г., Абубакиров A.Н. Результаты преимплатационного генетического скрининга эмбрионов у супружеских пар с фрагментацией ДНК сперматозоидов. Акушерство и гинекология. 2017; 8: 104-8.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.8.104-8
Также по теме
