Молекулярные маркеры цервиковагинальной жидкости: новое в диагностике и прогнозировании заболеваний, ассоциированных с вирусом папилломы человека

Зардиашвили М.Д., Назарова Н.М., Стародубцева Н.Л., Бугрова А.Е., Франкевич В.Е., Прилепская В.Н.

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Провести систематический анализ данных, имеющихся в современной литературе о значении молекулярных маркеров цервиковагинальной жидкости в диагностике заболеваний шейки матки, ассоциированных с вирусом папилломы человека и представить перспективы изучения протеомного и метаболомного профилей цервиковагинальной жидкости для прогнозирования течения неопластических процессов шейки матки.
Материал и методы. В обзор включены данные зарубежных и отечественных статей, найденных в Pubmed по данной теме, опубликованных за последние 5 лет.
Результаты. Описаны ряд протеомных маркеров цервиковагинальной жидкости для ранней диагностики предраковых заболеваний и рака шейки матки.
Заключение. Необходимо проведение дальнейших исследований для выявления специфических молекулярно-генетических и протеомных маркеров цервиковагинальной жидкости, для ранней диагностики и прогнозирования течения ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки.

Ключевые слова

цервикальная интраэпителиальная неоплазия
вирус папилломы человека
цервиковагинальная жидкость
рак шейки матки
масс-спектрометрия
протеомика
метаболомика

Вирус папилломы человека (ВПЧ) является самой распространенной инфекцией, передающейся половым путем. В последнее время отмечается значительный рост заболеваний шейки матки, в которых этиологическую роль играет именно наличие высокоонкогенных штаммов ВПЧ [1, 2].

Известно, что 60 штаммов вируса из 120 способны вызывать заболевания половых органов [3–5]. По данным Европейского отделения Международного общества по изучению инфекции в акушерстве и гинекологии (I-IDSOG-EUROPE) ВПЧ подразделяются на следующие группы онкологического риска: высокого (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 46, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82-й типы) и низкого (6, 11, 40, 42, 43, 44, 54, 61, 70, 72, 81-й типы) [6].

Процесс ВПЧ-инфицирования начинается в клетках базального слоя эпителия, куда вирус проникает через микротравмы и участки воспаления. Процесс репликации и образования вирионов происходит по мере дифференцировки клеток и перемещения их в верхние слои, где вирус собирает капсид, и в процессе отшелушивания высвобождаются вирионы [7]. Эта стадия инфекции является продуктивной и может сопровождаться формированием цервикальной интраэпителиальной неоплазии (ЦИН) легкой степени. Далее инфекция переходит в стадию трансформации, и на протяжении длительного периода (от 1 до 10 лет) разные степени неоплазии, как правило, последовательно сменяют друг друга. В молекулярно-биологическом плане это сопровождается патологическими изменениями механизмов клеточной пролиферации, дифференцировки, апоптоза, нарастанием генетической нестабильности и атипии клеток. Инвазия измененных клеток сопровождается нарушением межклеточных контактов, выделением факторов, разрушающих базальную мембрану, стимулирующих неоангиогенез и сосудистую мимикрию.

После инфицирования ВПЧ уже через 3 года у 27% женщин развивается ЦИН высокой степени. Наиболее опасным фактором прогрессии является длительная (более 2 лет) персистенция ВПЧ [8].

Известно, что в большинстве случаев (85–90%) ВПЧ-инфекция спонтанно регрессирует в течение нескольких месяцев. Однако, если ВПЧ высокоонкогенных типов не элиминируются, риск развития ЦИН шейки матки различной степени, а также инвазивной карциномы, увеличивается. Это обусловливает важность диагностики ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки на ранних этапах их развития [9].

По данным исследования 2004–2008 гг., проведенного Центром по контролю и профилактике заболеваний США (CDC), за год в США регистрируется около 33 300 случаев ВПЧ-ассоциированного рака. 21 300 случаев ВПЧ-ассоциированного рака диагностируется каждый год среди женщин и около 12 000 – среди мужчин. Рак шейки матки (РШМ) является наиболее распространенной формой ВПЧ-ассоциированного рака среди женщин. ВПЧ является причиной более чем 91% анального рака и РШМ, более 75% – рака влагалища и 69% – рака вульвы (данные международного агентства по исследованию рака) (табл. 1) [10].

Диагностика ВПЧ-ассоциированных заболеваний

Исследования последних 20 лет привели к пониманию многих моментов биологии ВПЧ и сыграли большую роль в поиске и разработке новых методов диагностики. В диагностике предраковых заболеваний и РШМ применяются различные методы: цитологический; расширенная вульво-, вагино- и кольпоскопия; жидкостная цитология; молекулярно-генетические (генотипирование вируса, определение вирусной нагрузки, экспрессия вирусных онкобелков Е6, Е7, метод «гибридного захвата» (Digene-тест)); морфологическое исследование; иммуноцитохимическое и иммуногистохимическое исследование онкомаркеров p16 и Кi67; оптико-электронное сканирование ткани шейки матки (TruScreen). Скрининг РШМ в России включает в себя взятие мазков на онкоцитологию, в то время как в США и в ряде стран Европейского Сообщества сегодня предпочтение отдается ВПЧ-тесту.

Проведение кольпоскопии с последующей биопсией является стандартом диагностики характера патологически измененного эпителия шейки матки [11].

Но гистологическое заключение, как правило, сводится к анализу структуры тканей и не может быть маркером риска дальнейшего прогрессирования процесса или его регресса, что является очень важным для молодых женщин. К тому же ошибки, которые встречаются при гистологическом анализе ЦИН различной степени тяжести, могут приводить либо к слишком интенсивному, иногда неоправданному лечению, либо, наоборот, к недостаточно радикальному лечению пациентов, что особенно опасно при дисплазии тяжелой степени. В этой связи особое значение приобретают молекулярно-генетические исследования, а также анализ молекулярного состава биологических жидкостей и тканей методами масс-спектрометрии (МC) и ядерно-магнитного резонанса (ЯМР) [11].

Роль цервиковагинальной жидкости (ЦВЖ) в диагностике различных состояний женского репродуктивного тракта

ЦВЖ имеет огромное значение в поддержании гомеостаза и иммунитете женского полового тракта. В частности, ЦВЖ можно рассматривать как источник биомаркеров гинекологических заболеваний, так как молекулярный состав ЦВЖ определяется состоянием органов женской репродуктивной системы [9].

Женский репродуктивный тракт обладает уникальной иммунологической микросредой, обеспечивающей выполнение генеративной функции [12]. Слизистые оболочки генитального тракта создают механический и функциональный барьер для вторжения патогенных микроорганизмов путем выделения слизистого секрета, который увлажняет поверхность и препятствует адгезии бактерий на эпителиальных клетках [13]. Одновременно слизистые оболочки являются иммунологическим фильтром, в котором можно выделить клеточное (макрофаги, нейтрофилы и лимфоциты) и гуморальное звено (иммуноглобулины, эйкозаноиды (простагландины и лейкотриены), лактоферрин, лизоцим, пропердин, белки системы комплемента, цитокины и др.) [14, 15].

Слизистая оболочка нижних отделов женских половых путей заселена синантропными бактериями, которые являются важным защитным фактором. Нормальная влагалищная флора состоит в основном из лактобацилл (Lactobacillus (L) crispatus, L. iners, L. Jensenii); также могут присутствовать и облигатно-анаэробные виды микроорганизмов, но в существенно более низких концентрациях. Гликоген из отслоившихся эпителиальных клеток сначала метаболизируется до глюкозы, которая затем используется флорой влагалища для выработки молочной кислоты, поддерживающей рН среды влагалища на низком (3,8–4,5) уровне [15–18]. Кроме того, некоторые лактобациллы (например, L. crispatus) вырабатывают перекись водорода в смертельной для патогенных микроорганизмов концентрации. Комменсалы могут конкурировать с нерезидентными бактериями за доступность питательных веществ, а некоторые бактерии производят широкий спектр антимикробных пептидов (бактериоцинов), лизоцим и аминокислоты. Все эти факторы подавляют рост чужеродных бактерий и оказывают совместно селективное антимикробное действие, способствующее сохранению нормальной микрофлоры влагалища [13, 14, 18, 19].

Адаптационные механизмы локального иммунитета нижнего отдела половых путей в настоящее время известны. Так, дендритные клетки (клетки Лангерганса) слизистых оболочек половых путей, способны представлять антигены Т-лимфоцитам и в результате запускать адаптивный иммунный ответ [16, 20]. Кроме того, плазматические клетки, локализованные в соединительной ткани слизистой оболочки, выделяют иммуноглобулины IgG и секреторные IgA в ЦВЖ. Эти иммуноглобулины способствуют активации других клеток иммунной системы, препятствуя бактериальной адгезии и опсонизации патогенов [14]. Другим важным компонентом локального иммунитета системы женских половых органов является ЦВЖ, которая состоит из выделений сальных, потовых, бартолиновых и желез Скене, транссудата плазмы, отслоившихся эпителиальных клеток, бактериальных продуктов, шеечной слизи, секрета желез эндометрия и маточных труб [21]. ЦВЖ состоит в основном из воды и содержит муцин, белки, углеводы, липиды, холестерин, аминокислоты и неорганические ионы. В составе ЦВЖ были определены возможные белки-маркеры различных заболеваний генитального тракта (бактериальный вагиноз, вагиниты, цервициты) [22].

Выявление изменений протеомного состава ЦВЖ может дать важную информацию о патогенезе многочисленных гинекологических заболеваний, в первую очередь – хронических воспалительных процессах нижнего отдела генитального тракта. Исследования последних 10 лет подтвердили высокий потенциал диагностики и прогнозирования различных заболеваний при помощи биологических жидкостей организма [23], что также справедливо и для ЦВЖ. Низкая стоимость и простота забора образца, отсутствие риска осложнений, связанных с биопсией, а также возможность наблюдения большого числа больных с использованием множества образцов являются очевидными преимуществами использования ЦВЖ для диагностики различных состояний женского генитального тракта [24–26]. Для сбора ЦВЖ наиболее часто применяются четыре метода: цервиковагинальный смыв (влагалище и влагалищную часть шейки матки промывают буферным раствором, то есть 5% уксусной кислотой или физиологическим раствором, после чего собирается полученная жидкость); цервиковагинальные щетки (специальные щетки, которые прикладываются к слизистой оболочке влагалища и шейки матки, чтобы собрать ЦВЖ); цервиковагинальные тампоны (тампоны или губки, поглощающие ЦВЖ); устройства мембранного типа (специальная чашечка для сбора цервикальной жидкости).

Ряд исследователей полагают, что биомаркеры, определяемые в ЦВЖ, окажутся более специфичными и чувствительными для раннего определения патологических процессов женской репродуктивной системы по сравнению с биомаркерами в крови [27]. Результаты протеомных исследований демонстрируют, что образцы ЦВЖ женщин с бактериальным вагинозом имеют дефицит антимикробной активности в связи с низкими уровнями экспрессии нескольких антимикробных пептидов таких как: секреторный ингибитор протеиназы лейкоцитов (SLPI), дефензины, лизоцим и лактоферрин [18, 28–31]. Кроме того, обнаружены различия в уровнях экспрессии некоторых провоспалительных цитокинов, коррелирующие с бактериальным вагинозом. Таким образом, бактериальный вагиноз приводит к нарушению нормального врожденного и адаптивного иммунного ответа и индуцирует воспалительные изменения в нижних отделах половых путей, что может привести к повышенной восприимчивости к инфекциям, передающихся половым путем, в том числе к ВИЧ-инфекции [32, 33].

Анализ ЦВЖ с использованием методов протеомики может дать новую информацию о нарушениях реакций иммунитета женских половых органов, их связи с развитием бактериального вагиноза, хронического цервицита, вагинита, и более глубоко изучить этиологию и патогенез указанных заболеваний. Однако надо иметь в виду, что ряд факторов оказывает влияние на белковый состав ЦВЖ, например, колебания содержания эстрогенов и прогестерона в течение менструального цикла [15, 34], сопутствующие заболевания, возраст [35], использование противозачаточных средств [36–39].

Протеомный анализ ЦВЖ

Группой N. Venkataraman [40] впервые был исследован белковый состав ЦВЖ и доказана роль ЦВЖ в защите организма от ВИЧ. Авторы показали, что в ЦВЖ проявляется анти-ВИЧ активность, формирование которой обеспечивается синергичным действием множества белков и пептидов, в частности кальгранулина А/B, лизоцима, человеческого нейтрофильного пептида, елафина и некоторых гистонов.

Di Quinzio и соавт. исследовали фракции белков ЦВЖ 5 женщин в 3-м триместре беременности с целью прогнозирования начала предстоящих родов. Авторы выделили 15 белков, присутствующих во всех образцах ЦВЖ [41]. Функции этих белков связаны с процессами кровообращения, структурной целостности, метаболизма жирных кислот, связыванием кальция, воспалительного ответа. В результате была создана панель белков-маркеров преждевременного разрыва плодных оболочек [42]. При анализе фракций белков ЦВЖ весом 25–45 кДа у беременных женщин за 14–17, 7–10 и 0–3 дня до родов и во время родов были обнаружены изменения в экспрессии пяти белков (серпин Б3, серпин Б1, аннексин А3, коллаген альфа-2 IV типа и альбумин), которые коррелируют с естественными изменениями, характерными для преждевременных родов [42].

S. Dasari с соавт. провел полный протеомный анализ ЦВЖ [43]. В результате идентифицировано 150 белков, большинство из которых выполняют иммунные, защитные или метаболические функции, из них 77 белков оказались уникальными по сравнению с белками крови и амниотической жидкости. Оказалось, что экспрессия 28 белков ЦВЖ отличается у женщин с угрожающими преждевременными родами. Из них 17, которые были подтверждены методом дифференциального двумерного электрофореза (2D-DIGE), могут рассматриваться в качестве потенциальных биомаркеров спонтанных преждевременных родов [12].

Полномасштабный протеомный скрининг ЦВЖ, выполненный группой J.L. Shaw высокочувствительными методами двумерной хромато-масс-спектрометрии, обнаружили более 680 белков в ЦВЖ, причем представленность белков калликреиновой группы была ассоциирована с риском преждевременного разрыва оболочек плодного пузыря. Данные белки принимают участие в отшелушивании вагинальных эпителиальных клеток и активации цервиковагинальных антимикробных белков. Экспрессия цервиковагинального калликреина связана с преждевременным разрывом оболочек плодного пузыря [44].

Группой L.J. Tang была продемонстрирована возможность активации полиморфноядерных клеток (нейтрофилов и эозинофилов) белками ЦВЖ, секретируемыми в нижних отделах женского генитального тракта. В 47% случаев состав ЦВЖ представлен белками, которые могут влиять на проницаемость слизистой оболочки половых путей. Поскольку проницаемость часто повышается в случае воспалительных заболеваний шейки матки (эндометриты, цервициты, вагиниты, вульвиты и др.), эти плазменные белки, в конечном счете, могут быть использованы вместе с секретируемыми белками активированных нейтрофилов и эозинофилов (например, лактоферрин, миелопероксидазы, липокалин и эозинофильные белки) в качестве маркеров для ранней диагностики воспаления нижних отделов генитального тракта [45].

Белковый состав ЦВЖ отражает не только изменения, связанные с беременностью, но и ранние изменения, появляющиеся при поражении эпителия шейки матки во время заболеваний, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией. Следовательно, развитие цервикальных неоплазий и, впоследствии, РШМ находит свое отражение в белковом составе ЦВЖ. Протеомный анализ ЦВЖ выявил 16 возможных биомаркеров, из которых α-актинин-4 (р=0,001) и изозим пируваткиназы M1/M2 (р=0,014) оказались наиболее перспективными у пациенток с ВПЧ-ассоциированными заболеваниями шейки матки. Методом ELISA (n=28) было показано, что содержание альфа-актинина-4 достоверно отличается в образцах ЦВЖ здоровых женщин и женщин с ВПЧ-инфекцией (р=0,009). Дополнительно был измерен уровень α-актинин-4 в ЦВЖ 29 пациентов (n=29) при неоднократном заборе образцов и было обнаружено, что α-актинин-4 коррелирует с временем персистенции ВПЧ. Таким образом, альфа-актинин-4 является перспективным биомаркером для выявления предраковых заболеваний шейки матки [9]. Аналогично, группой G. Zegels при исследовании протеомного состава ЦВЖ при ВПЧ-ассоциированных заболеваниях шейки матки был выявлен белок S100A9 в качестве маркера патологического процесса. Белок S100A9 образует с S100A8 гетеродимер кальпротектин и обладает мощным антибактериальным действием [46]. В исследовании Andersch-Björkamn с соавт. было выявлено 178 белков цервикальной слизи. Результаты протеомного исследования показали, что состав цервикальной слизи был похож до и после овуляции, однако отличался во время овуляции, что проявлялось в изменении степени гликозилирования компонентов слизи [47, 48].

Доказано, что при персистенции высокоонкогенных типов ВПЧ возникает экспрессия онкобелков (Е6/Е7), в том числе в ЦВЖ. Онкобелки Е6 и Е7 взаимодействуют с генами, отвечающими за локальный иммунитет [49]. Во время этого периода, длительность которого может составлять до нескольких лет, иммунные клетки вызывают лизис атипических клеток многослойного плоского эпителия при одновременном противодействии со стороны ВПЧ. Ряд авторов полагают, что в 80% случаев поражение эпителия шейки матки легкой степени указывает на активность иммунной системы. Поэтому можно предположить, что иммунный ответ при интраэпителиальных поражениях шейки матки достаточен для эффективного лизиса атипичных клеток и содержание белков-биомаркеров в ЦВЖ, определенное методами иммуноферментного анализа или масс-спектрометрии, может быть потенциальным прогностическим фактором развития РШМ [50].

Заключение

Изучение протеомного и метаболомного профилей ЦВЖ представляется перспективным для прогнозирования течения неопластического процесса шейки матки и выявления корреляции между степенью тяжести ЦИН, ВПЧ-нагрузкой и уровнем данных маркеров в динамике наблюдения. Исследование специфических генетических, эпигенетических, протеомных изменений позволит в дальнейшем использовать их в многокомпонентной тестовой системе диагностики и прогноза ЦИН и начальных стадий рака. Также возможно развитие нового подхода в таргетной терапии РШМ.

Список литературы

1. Zur Hausen H. Human genital cancer: Synergism between two virus infections or synergism between a virus infection and initiating events? Lancet. 1982; 2(8312): 1370-2.

2. Zur Hausen H. Papillomaviruses causing cancer: evasion from host-cell control in early events in carcinogenesis. J. Natl. Cancer Inst. 2000; 92(9): 690-8.

3. Ашрафян Л.А., Киселев В.И. Опухоли репродуктивных органов (этиология и патогенез). М.: Дмитрейд График Групп; 2008. 216с.

4. Прилепская В.Н., ред. Заболевания шейки матки, влагалища, вульвы. М.: МЕДпресс-информ; 2005. 432с.

5. Роговская С.И. Папилломавирусная инфекция у женщин и патология шейки матки: в помощь практикующему врачу. 2-е изд. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2014. 208с/

6. Рекомендации по диагностике и лечению папилломавирусных инфекций женского генитального тракта. Официальная публикация Европейского Общества по инфекционным заболеваниям в акушерстве и гинекологии // European J. Inr. Immunol. Dis. Obstet. Gynaecol. 2001; vol. 4, 5. Suppl. 21.

7. Von Knebel-Doeberitz M. New markers for cervical dysplasia to visualize the genomic chaos created by aberrant oncogenic papillomavirus infections. Eur. J. Cancer. 2002; 38(17): 2229-42.

8. Wheeler C.M., Hunt W.C., Schiffman M., Castle P.E. Human papillomavirus genotypes and the cumulative 2-years risk of cervical precancer. J. Infect. Dis. 2006; 194(9): 1291-9.

9. Van Raemdonck G.A., Tjalma W.A., Coen E.P., Depuydt C.E., Van Ostade X.W. Identification of protein biomarkers for cervical cancer using human cervicovaginal fluid. PLoS One. 2014; 9(9): e106488.

10. http://www.cdc.gov/hpv

11. Ullal A., Roberts M., Bulmer J.N., Mathers M.E., Wadehra V. The role of cervical cytology and colposcopy in detecting cervical glandular neoplasia. Cytopathology. 2008; 20(6): 359-66.

12. Pereira P.M., Marques J.P., Soares A.R., Carreto L., Santos M.A. MicroRNA expression variability in human cervical tissues. PLoS One. 2010; 5(7): e11780.

13. Quayle A.J. The innate and early immune response to pathogen challenge in the female genital tract and the pivotal role of epithelial cells. J. Reprod. Immunol. 2002; 57(1-2): 61-79.

14. Cole A.M. Innate host defense of human vaginal and cervical mucosae. Curr. Top. Microbiol. Immunol. 2006; 306: 199-230.

15. Ochiel D.O., Fahey J.V., Ghosh M., Haddad S.N., Wira C.R. Innate immunity in the female reproductive tract: role of sex hormones in regulating uterine epithelial cell protection against pathogens. Cur.r Womens Health Rev. 2008, 4(2):102-17.

16. Iijima N., Thompson J.M., Iwasaki A. Dendritic cells and macrophages in the genitourinary tract. Mucosal Immunol. 2008; 1(6): 451-9.

17. Eschenbach D.A., Thwin S.S., Patton D.L., Hooton T.M., Stapleton A.E., Agnew K. et al. Influence of the normal menstrual cycle on vaginal tissue, discharge, and microflora. Clin. Infect. Dis. 2000; 30(6): 901-7.

18. Valore E.V., Park C.H., Igreti S.L., Ganz T. Antimicrobial components of vaginal fluid. Am. J. Obstet. Gynecol. 2002; 187(3): 561-8.

19. Rohan L.C., Sassi A.B. Vaginal drug delivery systems for HIV prevention. AAPS J. 2009; 11(1): 78-87.

20. Wira C.R., Grant-Tschudy K.S., Crane-Godreau M.A. Epithelial cells in the female reproductive tract: a central role as sentinels of immune protection. Am. J. Reprod. Immunol. 2005; 53(1): 65-76.

21. Klein L.L., Jonscher K.R., Heerwagen M.J., Gibbs R.S., McManaman J.L. Shotgun proteomic analysis of vaginal fluid from women in late pregnancy. Reprod. Sci. 2008; 15(3): 263-73.

22. Zegels G., Van Raemdonck G.A., Tjalma W.A., Van Ostade X.W. Use of cervicovaginal fluid for the identification of biomarkers for pathologies of the female genital tract. Proteome Sci. 2010; 8: 63.

23. Thomas P.D., Campbell M.J., Kejariwal A., Mi H., Karlak B., Daverman R. et al. PANTHER: a library of protein families and subfamilies indexed by function. Genome Res. 2003; 13(9): 2129-41.

24. Good D.M., Thongboonkerd V., Novak J., Bascands J.L., Schanstra J.P., Coon J.J. et al. Body fluid proteomics for biomarker discovery: lessons from the past hold the key to success in the future. J. Proteome Res. 2007; 6(12): 4549-55.

25. Veenstra T.D., Conrads T.P., Hood B.L., Avellino A.M., Ellenbogen R.G., Morrison R.S. Biomarkers: mining the biofluid proteome. Mol. Cell. Proteomics. 2005; 4(4): 409-18.

26. Hu S., Loo J.A., Wong D.T. Human body fluid proteome analysis. Proteomics. 2006; 6(23): 6326-53.

27. Schmidt A., Aebersold R. High-accuracy proteome maps of human body fluids. Genome Biol. 2006; 7(11): 242.

28. Balu R.B., Savitz D.A., Ananth C.V., Hartmann K.E., Miller W.C., Thorp J.M., Heine R.P. Bacterial vaginosis, vaginal fluid neutrophil defensins, and preterm birth. Obstet. Gynecol. 2003; 101(5, Pt1): 862-8.

29. Novak R.M., Donoval B.A., Graham P.J., Boksa L.A., Spear G., Hershow R.C. et al. Cervicovaginal levels of lactoferrin, secretory leukocyte protease inhibitor, and RANTES and the effects of coexisting vaginoses in human immunodeficiency virus (HIV)-seronegative women with a high risk of heterosexual acquisition of HIV infection. Clin. Vaccine Immunol. 2007; 14(9): 1102-7.

30. Wiesenfeld H.C., Heine R.P., Krohn M.A., Hillier S.L., Amortegui A.A., Nicolazzo M., Sweet R.L. Association between elevated neutrophil defensin levels and endometritis. J. Infect. Dis. 2002; 186(6): 792-7.

31. Xu J., Holzman C.B., Arvidson C.G., Chung H., Goepfert A.R. Midpregnancy vaginal fluid defensins, bacterial vaginosis, and risk of preterm delivery. Obstet. Gynecol. 2008; 112(3): 524-31.

32. St John E., Mares D., Spear G.T. Bacterial vaginosis and host immunity. Curr. HIV/AIDS Rep. 2007; 4(1): 22-8.

33. Spear G.T., St John E., Zariffard M.R. Bacterial vaginosis and human immunodeficiency virus infection. AIDS Res. Ther. 2007; 4: 25.

34. Wira C.R., Fahey J.V. A new strategy to understand how HIV infects women: identification of a window of vulnerability during the menstrual cycle. AIDS. 2008; 22(15): 1909-17.

35. Meng W., Du R., Wang Y., Chen Z., Ding Y. Human β-defensin messenger RNA is overexpressed in the cervical epithelia of patients with nongonococcal cervicitis. J. Low Genit. Tract. Dis. 2013; 17(4): 440-5.

36. Shimoya K., Zhang Q., Temma K., Kimura T., Tsujie T., Tsutsui T. et al. Secretory leukocyte protease inhibitor levels in cervicovaginal secretion of elderly women. Maturitas. 2006; 54(2): 141-8.

37. Cherpes T.L., Marrazzo J.M., Cosentino L.A., Meyn L.A., Murray P.J., Hillier S.L. Hormonal contraceptive use modulates the local inflammatory response to bacterial vaginosis. Sex. Transm. Infect. 2008; 84(1): 57-61.

38. Ildgruben A., Sjöberg I., Hammarström M.L., Bäckström T. Steroid receptor expression in vaginal epithelium of healthy fertile women and influences of hormonal contraceptive usage. Contraception. 2005; 72(5): 383-92.

39. Ildgruben A.K., Sjöberg I.M., Hammarstrom M.L. Influence of hormonal contraceptives on the immune cells and thickness of human vaginal epithelium. Obstet. Gynecol. 2003; 102(3): 571-82.

40. Venkataraman N., Cole A.L., Svoboda P., Pohl J., Cole A.M. Cationic polypeptides are required for anti-HIV-1 activity of human vaginal fluid. J. Immunol. 2005; 175(11): 7560-7.

41. Di Quinzio M.K., Oliva K., Holdsworth S.J., Ayhan M., Walker S.P., Rice G.E. et al. Proteomic analysis and characterisation of human cervico-vaginal fluid proteins. Aust. N. Z. J. Obstet. Gynaecol. 2007; 47(1): 9-15.

42. Heng Y.J., Di Quinzio M.K., Permezel M., Rice G.E., Georgiou H.M. Interleukin-1 receptor antagonist in human cervicovaginal fluid in term pregnancy and labor. Am. J. Obstet. Gynecol. 2008; 199(6): 656-73. e1-7.

43. Dasari S., Pereira L., Reddy A.P., Michaels J.E., Lu X., Jacob T. et al. Comprehensive proteomic analysis of human cervical-vaginal fluid. J. Proteome Res. 2007; 6(4): 1258-68.

44. Shaw J.L., Smith C.R., Diamandis E.P. Proteomic analysis of human cervico-vaginal fluid. J. Proteome Res. 2007; 6(7): 2859-65.

45. Tang L.J., De S.F., Odreman F., Venge P., Piva C., Guaschino S., Garcia R.C. Proteomic analysis of human cervical-vaginal fluids. J. Proteome Res. 2007; 6(7): 2874-83.

46. Zegels G., Van Raemdonck G.A., Coen E.P., Tjalma W.A., Van Ostade X.W. Comprehensive proteomic analysis of human cervical-vaginal fluid using colposcopy samples. Proteome Sci. 2009; 7: 17.

47. Andersch-Bjorkman Y., Thomsson K.A., Holmen Larsson J.M., Ekerhovd E., Hansson G.C. Large scale identification of proteins, mucins, and their O-glycosylation in the endocervical mucus during the menstrual cycle. Mol. Cell. Proteomics. 2007; 6(4): 708-16.

48. Panicker G., Ye Y., Wang D., Unger E.R. Characterization of the human cervical mucous proteome. Clin. Proteomics. 2010; 6(1-2): 18-28.

49. Ding T., Wang X., Ye F., Cheng X., Ma D., Lu W., Xie X. Distribution of human papillomavirus 58 and 52 E6/E7 variants in cervical neoplasia in Chinese women. Gynecol. Oncol. 2010; 119(3): 436-43.

50. Van Ostade X., Martin Dom, Van Raemdonck G. IPA. Analysis of cervicovaginal fluid from precancerous women points to the presence of biomarkers for the precancerous state of cervical carcinoma. Proteomes. 2014; 2(3): 426-50. doi:10.3390/proteomes2030426.

Поступила 19.06.2015
Принята в печать 26.06.2015

Об авторах / Для корреспонденции

Зардиашвили Мака Джемаловна, аспирант ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-03. E-mail: z-m-d@mail.ru
Назарова Нисо Мирзоевна, д.м.н., в.н.с. ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-03. E-mail: grab2@yandex.ru
Стародубцева Наталия Леонидовна, к.б.н., зав. лабораторией протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 463-98-67. E-mail: n_starodubtseva@oparina4.ru
Бугрова Анна Евгеньевна, к.б.н., с.н.с. лаборатории протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 562-65-90. E-mail: a_bugrova@oparina4.ru
Франкевич Владимир Евгеньевич, к.ф-м.н., руководитель отдела системной биологии в репродукции ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-07-88, доб. 2198. E-mail: v_frankevich@oparina4.ru
Прилепская Вера Николаевна, д.м.н., профессор, зам. директора ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-69-34. E-mail: VPrilepskaya@mail.ru

Для цитирования: Зардиашвили М.Д., Назарова Н.М., Стародубцева Н.Л., Бугрова А.Е., Франкевич В.Е., Прилепская В.Н. Молекулярные маркеры цервиковагинальной жидкости: новое в диагностике и прогнозировании заболеваний, ассоциированных с вирусом папилломы человека. Акушерство и гинекология. 2016; 1:16-21.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.1.16-21

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.