Иммуногистохимические особенности эутопического и эктопического эндометрия у пациенток с рецидивирующим течением эндометриоидных кист яичников
Цель исследования. Изучить экспрессию факторов пролиферации и апоптоза (ki-67, bcl-2), воспалительных факторов (NF-kβ p65, COX-2), факторов адгезии (b-катенин), эстрогеновых (ER-α) и прогестероновых (PR-α) рецепторов в эутопическом эндометрии и капсуле эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ) у пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ.Пшеничнюк Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В., Зайцев Н.В.
Материал и методы. В исследование включены 60 пациенток репродуктивного возраста с ЭКЯ, находившихся на лечении в отделении оперативной гинекологии ФГБУ НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова Минздрава России в 2015–2016 гг. В зависимости от течения заболевания за период наблюдения 1,5 года после оперативного лечения пациентки разделены на две группы: 1-я группа – 41 пациентка без рецидива ЭКЯ (группа сравнения); 2-я группа – 19 пациенток с рецидивом ЭКЯ (основная группа). В работе использовали гистологический и иммуногистохимический методы исследования. Иммуногистохимическое исследование эутопического эндометрия и капсулы ЭКЯ проводили при помощи набора Tissue-Tek Quick-Ray. В исследовании использовались антитела к ki-67 (clone 30-9, VENTANA), Bcl-2 (clone 124, VENTANA), NF-kβ p65 (clone p65, Spring Bioscience Corp.), COX-2 (clone СХ-294, Agilent), b-катенину (clone 14, VENTANA), ER-α (clone SP1, VENTANA) и PR-α (clone 1E2, VENTANA).
Результаты. Эктопический эндометрий (капсула ЭКЯ) характеризуется изменением экспрессии ER-α, PR-α, ki-67, bcl-2, NF-kb p65, СОХ-2 и b-катенина, которые являются факторами, участвующими в патогенезе эндометриоза. У пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ повышена экспрессия PR-α в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,0277), понижена экспрессия ki-67 в эпителиальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,044), понижена экспрессия NF-kb p65 и СОХ-2 в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,0082, р=0,00245 соответственно) и повышена экспрессия b-катенина в стромальном компоненте капсулы ЭКЯ (р=0,017). У пациенток с рецидивирующим течением ЭКЯ повышена экспрессия PR-α в секреторную фазу в эпителиальном компоненте эутопического эндометрия (р=0,0253) и экспрессия NF-kb p65 в пролиферативную фазу в стромальном компоненте эутопического эндометрия (р=0,0278).
Заключение. Иммуногистохимическое исследование экспрессии PR-α, ki-67, NF-kb p65, СОХ-2 и b-катенина в капсуле ЭКЯ и экспрессии PR-α и NF-kb p65 в эутопическом эндометрии может помочь сразу после оперативного лечения выявлять пациенток с высоким риском рецидивирования ЭКЯ. Дальнейшие исследования этих факторов позволят изучить молекулярные механизмы, лежащие в основе патогенеза рецидивирования ЭКЯ, что позволит воздействовать на эти механизмы для устранения фундаментальных причин рецидива эндометриоза.
Ключевые слова
эутопический эндометрий
эктопический эндометрий
эндометриоидные кисты яичников
рецидивирование
предикторы рецидивирования
иммуногистохимическое исследование
ki-67
bcl-2
NF-kβ p65
COX-2
b-катенин
ER-α
PR-α
Список литературы
1. Адамян Л.В., Андреева Е.Н., Аполихина И.А., Беженарь В.Ф. ,Геворкян М.А., Гус А.И., Демидов В.Н., Калинина Е.А., Леваков С.А., Марченко Л.А., Попов А.А., Сонова М.М., Хашукоева А.З., Чернуха Г.Е., Ягоцкая Е.Л. Эндометриоз: диагностика, лечение и реабилитация. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных. М.: Российское общество акушеров-гинекологов; 2013.
2. Тихончук Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В. Молекулярно-биологические изменения эндометрия у женщин с наружным генитальным эндометриозом. Акушерство и гинекология. 2016; 11: 42-8. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.11.42-8
3. Тихончук Е.Ю., Непша О.С., Адамян Л.В., Кузнецова М.В. Омиксные технологии в исследовании патогенеза эндометриоза. Проблемы репродукции. 2016; 22(5): 110-22.
4. Han A.R., Lee T.H., Kim S., Lee H.Y. Risk factors and biomarkers for the recurrence of ovarian endometrioma: about the immunoreactivity of progesterone receptor isoform B and nuclear factor kappa B. Gynecol. Endocrinol. 2017; 33(1): 70-4. doi: 10.1080/09513590.2016.1205580.
5. de Ziegler D., Borghese B., Chapron C. Endometriosis and infertility: pathophysiology and management. Lancet. 2010; 376(9742): 730-8. doi: 10.1016/S0140-6736(10)60490-4.
6. Barcelos I.D., Vieira R.C., Ferreira E.M., Martins W.P., Ferriani R.A., Navarro P.A. Comparative analysis of the spindle and chromosome configurations of in vitro-matured oocytes from patients with endometriosis and from control subjects: a pilot study. Fertil. Steril. 2009; 92(5): 1749-52. doi: 10.1016/j.fertnstert.2009.05.006.
7. Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine. Endometriosis and infertility: a committee opinion. Fertil. Steril. 2012; 98(3): 591-8.
8. Koninckx P.R., Ussia A., Keckstein J., Adamian L., Zupi E., Wattiez A., Gomel V. Evidence based medicine: pandora’s box of medical and surgical treatment of endometriosis. J. Minim. Invasive Gynecol. 2017; Nov. 24. pii: S1553-4650(17)31287-6. doi: 10.1016/j.jmig.2017.11.012.
9. Koninckx P.R., Ussia A., Adamyan L., Keckstein J., Wattiez A. Primary dysmenorrhea. J. Obstet. Gynaecol. Can. 2017; 39(7): 578-9. doi: 10.1016/j.jogc.2017.03.093.
10. Corona R., Binda M.M., Adamyan L., Gomel V., Koninckx P.R. N2O strongly prevents adhesion formation and postoperative pain in open surgery through a drug-like effect. Gynecol. Surg. 2017; 14(1): 21. doi: 10.1186/s10397-017-1024-2.
11. Maul L.V., Morrision J.E., Schollmeyer T., Alkatout I., Mettler L. Surgical therapy of ovarian endometrioma: recurrence and pregnancy rates. JSLS. 2014; 18(3). pii: e2014.00223. doi: 10.4293/JSLS.2014.00223.
12. Пшеничнюк Е.Ю., Кузнецова М.В., Бурменская О.В., Кочеткова Т.О., Непша О.С., Трофимов Д.Ю., Адамян Л.В. Ассоциация между частотами встречаемости однонуклеотидных полиморфизмов в генах ZNF366 и VEZT и риском развития различных форм наружного генитального эндометриоза: данные по российской популяции. Акушерство и гинекология. 2017; 6: 64-72. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.6.64-72
13. Кузнецова М.В., Пшеничнюк Е.Ю., Бурменская О.В., Асатурова А.В., Трофимов Д.Ю., Адамян Л.В. Исследование экспрессии генов в эутопическом эндометрии женщин с эндометриоидными кистами яичников. Акушерство и гинекология. 2017; 8: 93-102. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.8.93-102
14. Ouchi N., Akira S., Mine K., Ichikawa M., Takeshita T. Recurrence of ovarian endometrioma after laparoscopic excision: risk factors and prevention. J. Obstet. Gynaecol. Res. 2014; 40(1): 230-6. doi: 10.1111/jog.12164.
15. Koga K., Takamura M., Fujii T., Osuga Y. Prevention of the recurrence of symptom and lesions after conservative surgery for endometriosis. Fertil. Steril. 2015; 104(4): 793-801. doi: 10.1016/j.fertnstert.2015.08.026.
16. Somigliana E., Vercellini P., Vigano P., Benaglia L., Busnelli A., Fedele L. Postoperative medical therapy after surgical treatment of endometriosis: from adjuvant therapy to tertiary prevention. J. Minim. Invasive Gynecol. 2014; 21(3): 328-34. doi: 10.1016/j.jmig.2013.10.007.
17. Vercellini P., Somigliana E., Viganò P., De Matteis S., Barbara G., Fedele L. Post-operative endometriosis recurrence: a plea for prevention based on pathogenetic, epidemiological and clinical evidence. Reprod. Biomed. Online. 2010; 21(2): 259-65. doi: 10.1016/j.rbmo.2010.04.018.
18. Shen F., Wang Y., Lu Y., Yuan L., Liu X., Guo S.W. Immunoreactivity of progesterone receptor isoform B and nuclear factor kappa-B as biomarkers for recurrence of ovarian endometriomas. Am. J. Obstet. Gynecol. 2008; 199(5): 486. e10. doi: 10.1016/j.ajog.2008.04.040.
19. Ota H., Igarashi S. Expression of major histocompatibility complex class II antigen in endometriotic tissue in patients with endometriosis and adenomyosis. Fertil. Steril. 1993; 60(5): 834-8.
20. Kobayashi H., Uekuri C., Shigetomi H. Towards an understanding of the molecular mechanism of endometriosis: unbalancing epithelial-stromal genetic conflict. Gynecol. Endocrinol. 2014; 30(1): 7-15. doi: 10.3109/09513590.2013.831832.
21. Hayashi A., Tanabe A., Kawabe S., Hayashi M., Yuguchi H., Yamashita Y. et al. Dienogest increases the progesterone receptor isoform B/A ratio in patients with ovarian endometriosis. J. Ovarian Res. 2012; 5(1): 31. doi: 10.1186/1757-2215-5-31.
22. Bergqvist A., Fernö M. Estrogen and progesterone receptors in endometriotic tissue and endometrium: comparison according to localization and recurrence. Fertil. Steril. 1993; 60(1): 63-8.
23. Yu X., Ren H., Liu T., Yong M., Zhong H. Expression and significance of ERβ and TrkB in endometriosis. Clin. Exp. Obstet. Gynecol. 2016; 43(1): 75-81.
24. Béliard A., Noël A., Foidart J.M. Reduction of apoptosis and proliferation in endometriosis. Fertil. Steril. 2004; 82(1): 80-5.
25. Yalcin S.E., Ocal I., Yalcin Y., Selim H.S., Caltekin M.D., Aydogmus H., Kelekci S. Evaluation of the Ki-67proliferation index and urocortin expression in women with ovarian endometriomas. Eurasian J. Med. 2017; 49(2): 107-12. doi: 10.5152/eurasianjmed.2017.17070.
26. Быков А.Г., Адамян Л.В., Наговицына М.Н., Щеголев А.И. Иммуногистохимическая характеристика пролиферативной активности клеток при эндометриозе яичников. В кн.: Материалы XI Международного когресса по репродуктивной медицине. Москва, 17-20 января 2017 года. М.; 2017: 95-6.
27. Brătilă E., Brătilă C.P., Comandaşu D.E., Bauşic V., Vlădescu C.T., Mehedinţu C. et al. The assessment of immunohistochemical profile of endometriosis implants, a practical method to appreciate the aggressiveness and recurrence risk of endometriosis. Rom. J. Morphol. Embryol. 2015; 56(4): 1301-7.
28. Jones R.K., Searle R.F., Bulmer J.N. Apoptosis and bcl-2 expression in normal human endometrium, endometriosis and adenomyosis. Hum. Reprod. 1998; 13(12): 3496-502.
29. Щеголев А.И., Быков А.Г., Файзуллина Н.М., Адамян Л.В. Иммуногистохимические особенности экспрессии O6-метинилгуанин-ДНК-метилтрансферазы при эндометриозе яичников. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2017; 164(9): 372-6.
30. Bozdag G. Recurrence of endometriosis: risk factors, mechanisms and biomarkers. Womens Health (London). 2015; 11(5): 693-9. doi: 10.2217/whe.15.56.
31. Reis F.M., Petraglia F., Taylor R.N. Endometriosis: hormone regulation and clinical consequences of chemotaxis and apoptosis. Hum. Reprod. Update. 2013; 19(4): 406-18. doi: 10.1093/humupd/dmt010.
32. Fanfani F., Fagotti A., Ferrandina G., Bifulco G., Legge F., Lorusso D. et al. Increased cyclooxygenase-2 expression is associated with better clinical outcome in patients submitted to complete ablation for severe endometriosis. Hum. Reprod. 2005; 20(10): 2964-8.
33. Yuan L., Shen F., Lu Y., Liu X., Guo S.W. Cyclooxygenase-2 overexpression in ovarian endometriomas is associated with higher risk of recurrence. Fertil. Steril. 2009; 91(4, Suppl.): 1303-6. doi: 10.1016/j.fertnstert.2008.01.070.
34. Banu S.K., Lee J., Speights V.O. Jr., Starzinski-Powitz A., Arosh J.A. Cyclooxygenase-2 regulates survival, migration, and invasion of human endometriotic cells through multiple mechanisms. Endocrinology. 2008; 149(3): 1180-9.
35. Fagotti A., Ferrandina G., Fanfani F., Legge F., Lauriola L., Gessi M. et al. Analysis of cyclooxygenase-2 (COX-2) expression in different sites of endometriosis and correlation with clinico-pathological parameters. Hum. Reprod. 2004; 19(2): 393-7.
36. Xiong W., Zhang L., Xiong Y., Liu H., Liu Y. Hypoxia promotes invasion of endometrial stromal cells via hypoxia-inducible factor 1α upregulation-mediated β-catenin activation in endometriosis. Reprod. Sci. 2016; 23(4): 531-41. doi: 10.1177/1933719115607999.
Поступила 08.12.2017
Принята в печать 22.12.2017
Об авторах / Для корреспонденции
Пшеничнюк Екатерина Юрьевна, аспирант отделения оперативной гинекологии ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (917) 559-11-01. Е-mail: best-kauty@mail.ru. ORCID iD 0000-0003-3805-3530
Асатурова Александра Вячеславовна, к.м.н., старший научный сотрудник патологоанатомического отделения ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-23-11. E-mail: a_asaturova@oparina4.ru
Адамян Лейла Владимировна, д.м.н., профессор, академик РАН; зам. директора по науке, руководитель отделения оперативной гинекологии ФГБУ НМИЦ АГП
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России; зав.кафедрой репродуктивной медицины и хирургии ФПДО, МГМСУ.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4
Зайцев Никон Владимирович, врач-патологоанатом патологоанатомического отделения ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4
Для цитирования: Пшеничнюк Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В.,
Зайцев Н.В. Иммуногистохимические особенности эутопического и эктопического эндометрия у пациенток с рецидивирующим течением эндометриоидных кист яичников. Акушерство и гинекология. 2018; 3: 84-95.
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2018.3.84-95
Также по теме
