Сравнительный анализ липидного состава перитонеальной жидкости и плазмы крови у пациенток с наружным генитальным эндометриозом и миомой матки
Цель исследования. Повышение эффективности диагностики наружного генитального эндометриоза методом прямой масс-спектрометрии.Борисова А.В., Чаговец В.В., Козаченко А.В., Стародубцева Н.Л., Кононихин А.С., Салимова Д.Ф., Коган Е.А., Адамян Л.В., Франкевич В.Е., Сухих Г.Т.
Материал и методы. В исследовании по типу случай-контроль участвовали 100 пациенток с наружным генитальным эндометриозом и 50 пациенток контрольной группы с миомой матки, подвергшихся оперативному лечению в гинекологическом отделении ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова МЗ РФ. Наружный генитальный эндометриоз был диагностирован на основании лечебно-диагностической лапароскопии и окончательно подтвержден гистологически. У всех участниц исследования производился забор крови и перитонеальной жидкости для определения их липидного состава. Качественную и количественную оценку липидома проводили с помощью масс-спектрометрии с электрораспылением. В результате анализа было выявлено более 140 молекулярных признаков, большую часть которых составляли липиды пяти классов: фосфатидилхолины, фосфатидилэтаноламины, сфингомиелины, ди- и триглицериды. Полученные экспериментальные данные были проанализированы с помощью многофакторного метода PLS-DA. Созданные статистические модели хорошо группируют данные по признаку случай-контроль и позволили выявить липиды, дающие наибольший вклад в кластеризацию данных.
Результаты. Выявлено значительное снижение уровня четырех липидов в крови и перитонеальной жидкости больных эндометриозом, в отличие от пациенток группы сравнения, а именно: фосфатидилхолина PC 36:4, лизофосфатидилхолина LPC 16:0, сфингомиелина SM 34:1, фосфаэтаноламина PE O-34:1. Уровень фосфаэтаноламина PE O-20:0 оказался повышенным не только в эндометриоидных тканях, но и в биологических жидкостях больных эндометриозом, что свидетельствует о возможной диагностической ценности данного липида. Чувствительность метода для плазмы крови составила 93%, специфичность – 95%; для перитонеальной жидкости чувствительность – 90%, специфичность – 95%.
Заключение. Данное исследование подтверждает участие фосфолипидов и сфинголипидов в патофизиологии эндометриоза, а также открывает новые возможности для неинвазивной диагностики наружного генитального эндометриоза.
Ключевые слова
эндометриоз
биомаркеры
масс-спектрометрия
фосфатидилхолин
фосфатидилэтаноламин
лизофосфатидилхолин
сфингомиелин
Список литературы
1. Адамян Л.В., Андреева Е.Н., Аполихина И.А., Беженарь В.Ф., Геворкян М.А., Гус А.И., Демидов В.Н., Калинина Е.А., Леваков С.А., Марченко Л.А., Попов А.А., Сонова М.М., Хашукова А.З., Чернуха Г.Е., Яроцкая Е.Л. Эндометриоз: диагностика, лечение, реабилитация. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных. М.; 2013: 2-9.
2. Щеголев А.И., Быков А.Г., Туманова У.Н., Павлович С.В. Эндометриоз и развитие опухолей. Акушерство и гинекология. 2016; 11: 49-56. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.11.49-56
3. Фархат К.Н., Адамян Л.В. Аномалии развития матки и влагалища в сочетании с эндометриозом: тактика ведения и хирургическая коррекция. Акушерство и гинекология. 2016; 5: 96-102. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.5.96-102
4. Burney R.O., Giudice L.C. Pathogenesis and pathophysiology of endometriosis. Fertil. Steril. 2012; 98(3): 511-9.
5. Бурлев В.А., Павлович С.В., Ильясова Н.А. Апоптоз и пролиферативная активность в эндометрии при перитонеальном эндометриозе. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2006; 141(2): 165-8.
6. Мельников М.В., Чупрынин В.Д., Аскольская С.В., Хабас Г.Н., Матроницкий Р.Б., Вередченко А.В., Бурыкина П.Н., Попов Ю.В., Хачатрян А.М., Хачатрян А.М., Хилькевич Е.Г. Диагностика и тактика хирургического лечения инфильтративного эндометриоза у пациенток репродуктивного возраста. Акушерство и гинекология. 2012; 7: 42-9.
7. Johnson N.P., Hummelshoj L. World Endometriosis Society Montpellier Consortium. Consensus on current management of endometriosis. Hum. Reprod. 2013; 28(6): 1552-68.
8. Борисова А.В., Стародубцева Н.Л., Козаченко А.В., Чаговец В.В., Салимова Д.Ф., Кононихин А.С., Коган Е.А., Адамян Л.В., Франкевич В.Е., Сухих Г.Т. Исследование очагов эндометриоза различной локализации методом прямой масс-спектрометрии. Акушерство и гинекология. 2016; 9: 101-8. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.9.101-8
9. Vouk K., Hevir N., Ribic-Pucelj M., Haarpaintner G., Scherb H., Osredkar J. et al. Discovery of phosphatidylcholines and sphingomyelins as biomarkers for ovarian endometriosis. Hum. Reprod. 2012; 27(10):2955-65.
10. Dutta M., Joshi M., Srivastava S., Lodh I., Chakravarty B., Chaudhury K. A metabonomics approach as a means for identification of potential biomarkers for early diagnosis of endometriosis. Mol. Biosyst. 2012: 8(12): 3281-7.
11. Lee Y.H., Tan C.W., Venkatratnam A., Tan C.S., Cui L., Loh S.F. et al. Dysregulated sphingolipid metabolism in endometriosis. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2014; 99(10): 1913-21.
12. Folch J., Lees M., Sloane Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J. Biol. Chem. 1957; 226(1): 497-509.
13. Trygg J., Wold S. Orthogonal projections to latent structures (O-PLS). J. Chemometrics. 2002; 16(3): 119-28.
14. Sud M., Fahy E., Cotter D., Brown A., Dennis E.A., Glass C.K. et al. LMSD: LIPID MAPS structure database. Nucleic Acid Res. 2007; 35(Database issue): D527-32.
15. Vouk K., Ribič-Pucelj M., Adamski J., Rižner T.L. Altered levels of acylcarnitines, phosphatidylcholines, and sphingomyelins in peritoneal fluid from ovarian endometriosis patients. J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 2016;159: 60-9.
16. Дубинская Е.Д., Федорова Т.А., Лаптева Н.В., Великян О.М. Оксидативный стресс и эндогенная интоксикация у пациенток с бесплодием и перитонеальной формой эндометриоза с учетом полиморфизма гена NAT2. Проблемы репродукции. 2014; 4: 39-44.
17. Лисица А.В., Пономаренко Е.А., Лохов П.Г., Арчаков А.И. Постгеномная медицина: альтернатива биомаркерам. Вестник Российской академии медицинских наук. 2016; 3: 255-60.
18. Угаров Г.С. О роли воды и липидов в организации живой материи. Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2015; 5: 443-7.
19. Pavlovic Z., Bakovic M. Regulation of phosphatidylethanolamine homeostasis – The critical role of CTP: phosphoethanolamine cytidylyltransferase (Pcyt2). Int. J. Mol. Sci. 2013; 14(2): 2529-50.
20. Zhu L., Bakovic M. Breast cancer cells adapt to metabolic stress by increasing ethanolamine phospholipid synthesis and CTP: ethanolaminephosphate cytidylyltransferase-Pcyt2 activity. Biochem. Cell Biol. 2012; 90(2): 188-99.
21. Gibellini F., Smith T.K. The Kennedy pathway – de novo synthesis of phosphatidylethanolamine and phosphatidylcholine. IUBMB Life. 2010; 62(6): 414-28.
22. Bleijerveld O.B., Klein W., Vaandrager A.B., Helms J.B., Houweling M. Control of the CDPethanolamine pathway in mammalian cells: Effect of ctp:phosphoethanolamine cytidylyltransferase overexpression and the amount of intracellular diacylglycerol. Biochem. J. 2004; 379(Pt 3): 711-9.
23. Zhu L., Johnson C., Bakovic M. Stimulation of the human CTP: phosphoethanolamine cytidylyltransferase gene by early growth response protein 1. J. Lipid Res. 2008; 49(10): 2197-211.
24. Bhoumik A., Fichtman B., Derossi C., Breitwieser W., Kluger H.M., Davis S. et al. Suppressor role of activating transcription factor 2 (ATF2) in skin cancer. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2008; 105(5): 1674-9.
25. Burney R.O., Giudice L.C. Pathogenesis and pathophysiology of endometriosis. Fertil. Steril. 2012; 98(3): 511-9.
26. Burney R.O., Talbi S., Hamilton A.E., Vo K.C., Nyegaard M., Nezhat C.R. et al. Gene expression analysis of endometrium reveals progesterone resistance and candidate susceptibility genes in women with endometriosis, Endocrinology. 2007; 148(8): 3814-26.
27. Corre I., Niaudet C., Paris F. Plasma membrane signaling induced by ionizing radiation. Mutat. Res. 2010; 704(1-3): 61-7.
28. Santulli P., Marcellin L., Noël J.C., Borghese B., Fayt I., Vaiman D. et al. Sphingosine pathway deregulation in endometriotic tissues. Fertil. Steril. 2012; 97(4): 904-11.
29. Santanam N., Fahrmann J., Cook C., King H., Egleton R., Dawley B.L. Oxidized lipoproteins are the alleged pain molecules in the peritoneal fluid of women with endometriosis. Fertil. Steril. 2010; 94(4, Suppl.): S145.
Поступила 10.02.2017
Принята в печать 17.02.2017
Об авторах / Для корреспонденции
Борисова Анна Валерьевна, аспирант ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 701-05-04. E-mail: aneta_b@mail.ru
Козаченко Андрей Владимирович, д.м.н., профессор РАН, в.н.с. ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 614-41-32. E-mail: andreykozachenko@list.ru
Стародубцева Наталия Леонидовна, к.б.н., зав. лабораторией протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 463-98-67. E-mail: n_starodubtseva@oparina4.ru
Коган Евгения Александровна, д.м.н., профессор, зав. кафедрой патологической анатомии лечебного факультета 1-го МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119991, Россия, Москва, ул. Малая Трубецкая, д. 8/2. Телефон: 8 (926) 533-12-71. E-mail: koganevg@gmail.com
Чаговец Виталий Викторович, к.ф-м.н., с.н.с. лаборатории протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 562-65-90. E-mail: vvchagovets@gmail.com
Салимова Динара Фаильевна, студентка 1-го МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России.
Адрес: 119991, Россия, Москва, ул. Малая Трубецкая, д. 8/2. Телефон: 8 (916) 206-07-66. E-mail: Salimova.1993@mail.ru
Кононихин Алексей Сергеевич, к.ф.м.н., научный сотрудник лаборатории протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 785-47-81. E-mail: a_kononihin@oparina4.ru
Франкевич Владимир Евгеньевич, к.ф-м.н., руководитель отдела системной биологии в репродукции ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-07-88, доб. 2198. E-mail: v_frankevich@oparina4.ru
Адамян Лейла Владимировна, академик РАН, профессор, заслуженный деятель науки РФ, заместитель директора по научной работе ФГБУ НЦАГиП
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-94-00.
E-mail: adamyanleila@gmail.com
Для цитирования: Борисова А.В., Чаговец В.В., Козаченко А.В.,
Стародубцева Н.Л., Кононихин А.С., Салимова Д.Ф., Коган Е.А., Адамян Л.В.,
Франкевич В.Е., Сухих Г.Т. Сравнительный анализ липидного состава
перитонеальной жидкости и плазмы крови у пациенток с наружным генитальным эндометриозом и миомой матки. Акушерство и гинекология. 2017; 6: 74-82.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.6.74-82
Также по теме
