Характеристика изменений протеомного состава цервиковагинальной жидкости при заболеваниях шейки матки, ассоциированных с ВПЧ-инфекцией
Цель исследования. Характеристика изменений протеомного состава цервиковагинальной жидкости для оценки степени тяжести ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки у пациенток репродуктивного возраста.Зардиашвили М.Д., Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Бугрова А.Е., Кононихин А.С., Бржозовский А.Г., Стародубцева Н.Л., Асатурова А.В., Сухих Г.Т.
Материал и методы. В исследовании приняли участие 30 пациенток, имеющих различные формы ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки (ASCUS, LSIL и HSIL). Из образцов цервиковагинальной жидкости (ЦВЖ) выделялись белки для дальнейшего протеомного анализа методом тандемной хромато-масс-спектрометрии (ВЭЖХ-МС/МС). Полуколичественный анализ данных, включающий идентификацию и аннотацию белков, осуществлялся с использованием программных пакетов MaxQuant и Perseus.
Результаты. Были определены белковые панели, специфичные для различных форм ВПЧ-ассоциированных поражений шейки матки (ASCUS, LSIL и HSIL). Первая группа белков (P4HB, HSPA8, C4BPA и др.) характеризует ранние изменения, ассоциированные с ВПЧ-инфекцией и связанные с поражением эпителия шейки матки, в том числе проникновение вируса в клетку и его транскрипцию, нарушение функции системы комплемента. Вторая группа белков (PRDX5, YWHAE, LRG1 и др.) принимает непосредственное участие в развитии неоплазий шейки матки и их прогрессировании, характеризует поздние изменения, в частности, снижение процесса апоптоза, нарушение дифференцировки и созревания эпителия, трансформацию атипических клеток.
Заключение. Таким образом, анализ протеома ЦВЖ позволяет изучать молекулярные механизмы патогенеза ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки и дифференцировать изменения эпителия на ранних этапах развития.
Ключевые слова
цервикальные интраэпителиальные неоплазии
ВПЧ
протеомика
масс-спектрометрия
цервиковагинальная жидкость
Список литературы
1. Zur Hausen H. Papillomaviruses causing cancer: evasion from host-cell control in early events in carcinogenesis. J. Natl. Cancer Inst. 2000; 92(9): 690-8.
2. http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs380/en
3. Бурменская О.В., Назарова Н.М., Прилепская В.Н., Мзарелуа Г.М., Бестаева Н.В., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т. Прогнозирование риска развития и прогрессирования цервикальных интраэпителиальных неоплазий, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией. Акушерство и гинекология. 2016; 2: 92-8. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.2.92-98
4. Van Raemdonck G.A., Tjalma W.A., Coen E.P., Depuydt C.E., Van Ostade X.W. Identification of protein biomarkers for cervical cancer using human cervicovaginal fluid. PLoS One. 2014; 9(9): e106488. doi: 10.1371/journal.pone.0106488. eCollection 2014.
5. Yang H., Lau W.B., Lau B., Xuan Y., Zhou S., Zhao L. et al. A mass spectrometric insight into the origins of benign gynecological disorders. Mass Spectrom Rev. 2017; 36(3): 450-70. doi: 10.1002/mas.21484.
6. Klein L.L., Jonscher K.R., Heerwagen M.H., Gibbs R.S., McManaman J.L. Shotgan proteomic analysis of vaginal fluid from woman in late pregnancy. Reprod. Sci. 2008; 15(3): 263-73.
7. Venkataraman N., Cole A.L., Svoboda P., Pohl J., Cole A.M. Cationic polypeptides are required for anti-HIV-1 activity of human vaginal fluid. J. Immunol. 2005; 175(11): 7560-7.
8. Good D.M., Thongboonkerd V., Novak J., Bascands J.L., Schanstra J.P., Coon J.J. et al. Body fluid proteomics for biomarker discovery: lessons from the past hold the key to success in the future. J. Proteome Res. 2007; 6(12): 4549-55.
9. Nayar R., Wilbur D.C. eds. The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology. Definitions, criteria, and explanatory notes. 3rd ed. New York: Springer; 2015.
10. Bi S., Hong P.W., Lee B., Baum L.G. Galectin-9 binding to cell surface protein disulfide isomerase regulates the redox environment to enhance T-cell migration and HIV entry. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2011; 108(26):10650-5.
11. Nakatsuji H., Nishimura N., Yamamura R., Kanayama H.O., Sasaki T. Involvement of actinin-4 in the recruitment of JRAB/MICAL-L2 to cell-cell junctions and the formation of functional tight junctions. Mol. Cell. Biol. 2008; 28(10): 3324-35. doi: 10.1128/MCB.00144-08.
12. Barbolina M.V., Adley B.P., Kelly D.L., Fought A.J., Scholtens D.M. et al. Motility-related actinin alpha-4 is associated with advanced and metastatic ovarian carcinoma. Lab. Invest. 2008; 88(6): 602-14. doi: 10.1038/labinvest.2008.25.
13. Pampalakis G., Prosnikli E., Agalioti T., Vlahou A., Zoumpourlis V., Sotiropoulou G. A tumor-protective role for human kallikrein-related peptidase 6 in breast cancer mediated by inhibition of epithelial-to-mesenchymal transition. Cancer Res. 2009; 69(9): 3779-87. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-08-1976.
14. Hayashido Y., Lucas A., Rougeot C., Godyna S., Argraves W.S., Rochefort H. Estradiol and fibulin-1 inhibit motility of human ovarian- and breast-cancer cells induced by fibronectin. Int. J. Cancer. 1998; 75(4): 654-8.
15. Quarta S., Vidalino L., Turato C., Ruvoletto M., Calabrese F., Valente M. et al. SERPINB3 induces epithelial-mesenchymal transition. J. Pathol. 2010; 221(3): 343-56. doi: 10.1002/path.2708.
16. Sun Y., Sheshadri N., Zong W.X. SERPINB3 and B4: From biochemistry to biology. Semin. Cell Dev. Biol. 2017; 62: 170-7. doi: 10.1016/j.semcdb.2016.09.005.
17. Shin J., Kim G., Lee J.W., Lee J.E., Kim Y.S., Yu J.H. et al. Identification of ganglioside GM2 activator playing a role in cancer cell migration through proteomic analysis of breast cancer secretomes. Cancer Sci. 2016; 107(6):828-35.
18. Welss T., Sun J., Irving J.A., Blum R., Smith A.I., Whisstock J.C. et al. Hurpin is a selective inhibitor of lysosomal cathepsin L and protects keratinocytes from ultraviolet-induced apoptosis. Biochemistry. 2003; 42(24): 7381-9.
19. Fang W.Y., Chen Y.W., Hsiao J.R., Liu C.S., Kuo Y.Z., Wang Y.C. et al. Elevated S100A9 expression in tumor stroma functions as an early recurrence marker for early-stage oral cancer patients through increased tumor cell invasion, angiogenesis, macrophage recruitment and interleukin-6 production. Oncotarget. 2015; 6(29): 28401-24. doi: 10.18632/oncotarget.4951.
Поступила 07.02.2017
Принята в печать 17.02.2017
Об авторах / Для корреспонденции
Зардиашвили Мака Джемаловна, аспирант ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 337-53-51. E-mail: z-m-d@mail.ru
Франкевич Владимир Евгеньевич, к.ф-м.н., руководитель отдела системной биологии в репродукции ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-07-88, доб. 2198. E-mail: v_frankevich@oparina4.ru
Назарова Нисо Мирзоевна, д.м.н., в.н.с. ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-03. E-mail: grab2@yandex.ru
Бугрова Анна Евгеньевна, к.б.н., с.н.с. лаборатории протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 562-65-90. E-mail: a_bugrova@oparina4.ru
Кононихин Алексей Сергеевич, к.ф.-м.н., научный сотрудник лаборатории протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926)-562-65-90. E-mail: konoleha@yandex.ru
Бржозовский Александр Геннадьевич, аспирант лаборатории протеомики Учреждения РАН ГНЦ РФ – Институт медико-биологических проблем РАН.
Адрес: 123007, Россия, г. Москва, Хорошёвское шоссе, д. 76. Телефон: 8 (916) 770-51-68. E-mail: agb.imbp@gmail.com
Стародубцева Наталия Леонидовна, к.б.н., зав. лабораторией протеомики репродукции человека ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 463-98-67. E-mail: n_starodubtseva@oparina4.ru
Асатурова Александра Вячеслововна, к.м.н., с.н.с. патологоанатомического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-23-11. E-mail: a_asaturova@oparina4.ru
Сухих Геннадий Тихонович, академик РАН, д.м.н., профессор, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-00. E-mail: g_sukhikh@oparina4.ru
Для цитирования: Зардиашвили М.Д., Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Бугрова А.Е., Кононихин А.С., Бржозовский А.Г., Стародубцева Н.Л., Асатурова А.В., Сухих Г.Т. Характеристика изменений протеомного состава цервиковагинальной жидкости при заболеваниях шейки матки, ассоциированных с ВПЧ-инфекцией. Акушерство и гинекология. 2017; 4: 88-94.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.4.88-94
Также по теме
