Первые результаты клинического применения экстрацеллюлярных микровезикул мезенхимальных стромальных клеток после абдоминального родоразрешения

Последнее десятилетие ознаменовалось радикальной сменой приоритетов для повторного и последующего абдоминального родоразрешения, поскольку наличие рубца миометрия после перенесенного в анамнезе кесарева сечения переместилось на первое место. Вот почему назрела настойчивая необходимость в поиске новых методов повышения эффективности репарации миометрия после перенесенной операции, чтобы спустя 2–3 года интергенетического интервала женщины смогли родить самопроизвольно. Для повышения регенерации тканей в клинической медицине на протяжении 15 лет с успехом используются клеточные технологии [1–3]. Тем не менее существуют определенные трудности для их широкого внедрения [4–7]. К одному из интересных механизмов действия стволовых клеток можно отнести их способность взаимодействия и обмена как белковым, так и генетическим материалом посредством секреции микровезикул, которые перспективны в плане улучшения репарации тканей, поскольку могут участвовать в передаче межклеточной информации и работать в качестве модулятора [8–13].

Основываясь на вышеизложенном, мы предполагаем, что использование экстрацеллюлярных микровезикул (ЭМВ) позволит улучшить течение послеоперационного периода и в дальнейшем родить самопроизвольно пациенткам с рубцом на матке после кесарева сечения, а системе родовспоможения – снизить частоту абдоминального родоразрешения. Тем более что проведенные экспериментальные исследования на модели кесарева сечения у лабораторных крыс инбредной линии Wag показали способность экзосом находиться в миометрии как интактных животных, так и после произведенного кесарева сечения не менее 8 суток (рис. 1–3) [14, 15].

Цель исследования: оценить переносимость введения ЭМВ мезенхимальных стромальных клеток (МСК) плацентарного происхождения во время абдоминального родоразрешения и в течение послеоперационного периода.

Материалы и методы

Обследованы и родоразрешены 53 пациентки. В зависимости от ведения послеоперационного периода все они были разделены на 2 группы: I группа (основная) – 23 беременные и роженицы, которым в ходе кесарева сечения после ушивания матки однорядным непрерывным викриловым швом в область разреза вводилось 500 мкл ЭМВ (экзосом) МСК, полученных в лаборатории клеточных технологий ФГБУ НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова [14, 15]. II группа (контрольная) – 30 беременных и рожениц, которым в ходе кесарева сечения проводилось традиционное ушивание нижнего сегмента матки однорядным непрерывным викриловым швом.

Возрастная характеристика беременных и рожениц представлена в таблице 1.

Как видно из представленной таблицы, пациентки были молодыми, и возраст в группах сравнения значимо не различался.

Информация о перенесенных соматических заболеваниях у пациенток из групп сравнения представлена в таблице 2. Что касается соматической патологии, то у беременных и рожениц из группы сравнения не было обнаружено значимых отличий. Практически каждая вторая страдала хроническим тонзиллитом (от 50 до 56,5%). Более чем у 40% диагностировано хроническое воспаление почек и у 17% – бронхов.

При этом инфекционный индекс (отношение общего числа инфекционных заболеваний к числу обследованных) у беременных и рожениц основной группы составил 1,3, а у пациенток из группы сравнения – 1,2 (табл. 2).

В социальном плане практически половина беременных, родоразрешенных путем кесарева сечения, не работали и занимались домашним хозяйством – от 46,6% до 47,8% (табл. 3).

Исходы предыдущих беременностей у пациенток групп сравнения представлены в таблице 4.

Заслуживает внимания, что практически каждая четвертая пациентка, 6 (26,1%) из основной и 7 (23,3%) из группы сравнения, имели в анамнезе прерывание беременности путем артифициального аборта по желанию, что в последующем могло спровоцировать самопроизвольное прерывание беременности у 4 (17, 4%) и 6 (20%) женщин из I и II группы соответственно.

Большое количество абортов находилось в прямой связи с низким уровнем контрацептивного образования включенных в исследование женщин. Фактически только каждая десятая пациентка (8,7%), которой в ходе абдоминального родоразрешения вводились 500 мкл экзосом, использовала какой-либо из методов предупреждения беременности. В группе сравнения показатель принципиально не отличался – 3 (10%).

Возраст менархе у пациенток был стандартным для российских женщин и составлял в среднем 13 лет (табл. 5), существенно не отличаясь в группах сравнения (p>0,05).

При анализе генитальной патологии (табл. 6.) выявлена высокая частота воспалительных заболеваний, что могло спровоцировать бесплодие, на которое предъявляла жалобы практически каждая 8-я беременная из основной – 3 (13,1%) и каждая 10-я – 3 (10%) из контрольной группы.

Таким образом, выполненный анализ клинического материала беременных и рожениц не выявил значимых различий в группах сравнения.

Статистический анализ

Для статистической обработки данных использовали электронные таблицы Microsoft Excel и пакет программ GraphPad Prism 6 (GraphPad Software, USA). При описании количественных данных, имеющих нормальное распределение, использовали среднее арифметическое (M) и стандартное отклонение (SD). При анализе параметрических данных рассчитывали среднее значение и среднеквадратичное отклонение, использовали парный t-test (для связанных данных). Различия считали значимыми при p<0,05.

Результаты и обсуждение

Подавляющее большинство пациенток основной группы – 21 (91,3%), которым интраоперационно вводилось 500 мкл ЭМВ, были первородящими без отягощенного акушерского анамнеза, желающими через 2–3 года родить повторно и самопроизвольно. 10 беременным (43,5%) было выполнено плановое кесарево сечение, учитывая наличие смешанного ягодичного предлежания. В 2 случаях (8,7%) операция выполнялась по поводу краевого предлежания плаценты.

Экстренное кесарево сечение было произведено 13 (56,5%) роженицам: каждой третьей (30,4%) – по поводу развившейся острой внутриутробной гипоксии плода; у каждой пятой (21,7%) показанием для экстренного родоразрешения послужила слабость родовой деятельности, не поддающаяся медикаментозной коррекции и в одном случае – по поводу выпадения петель пуповины при раннем излитии околоплодных вод (табл. 7).

У всех женщин кесарево сечение выполнялось в условиях эпидуральной анестезии с проведением интраоперационной антибактериальной профилактики.

Пациентки из групп сравнения, родоразрешенные путем кесарева сечения, практически не отличались ни по времени оперативного вмешательства, ни по общей интраоперационной кровопотере, ни по продолжительности I периода родов, если проводилось экстренное абдоминальное родоразрешение (табл. 8).

В ходе проведенного сравнительного исследования были выявлены значимые отличия между родильницами основной и контрольной групп по продолжительности безводного промежутка (табл. 8), который у пациенток группы сравнения составил 7,75 ч (0,48) и был меньше, чем у пациенток, которым интраоперационно вводились 500 мкл ЭМВ (р=0,041). Значимые различия были зарегистрированы и по продолжительности послеоперационного койко-дня (4,26 (0,09) в I группе против 5,33 (0,38) во II (р=0,02)). Подобная динамика прослеживалась и по числу лейкоцитов при выписке, которые в группе с интраоперационным введением экзосом составило 11,18 (0,48) ×1099/л, и их количество было значимо меньше, чем в группе сравнения, – 13,04 (0,33) ×109/л (р=0,02). У пациенток основной группы не было послеродовых воспалительных осложнений, тогда как у родильниц без введения экзосом было зафиксировано 2 эндометрита (6,7%) и 1 лохиометра (3,3%).

Заключение

Таким образом, полученные данные указывают на хорошую переносимость и более высокую эффективность интраоперационного введения ЭМВ по сравнению с традиционным ведением послеродового периода.

Первые результаты клинического применения экзосом открывают новые горизонты их использования. Они позволяют надеяться на улучшение репарации миометрия и прогнозировать в перспективе самопроизвольные роды у пациенток с рубцом после кесарева сечения.