Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем при предгестационной иммуноцитотерапии

Кречетова Л.В., Степанова Е.О., Николаева М.А., Вторушина В.В., Голубева Е.Л., Хачатрян Н.А., Тетруашвили Н.К., Сухих Г.Т.

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель работы. Исследование динамики процентного и абсолютного содержания субпопуляций лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем аллоиммунного генеза, включая субпопуляции киллерных клеток с различным фенотипом, естественных Т-регуляторных клеток и клеток, экспрессирующих молекулу CD200, в предгестационной подготовке с использованием иммуноцитотерапии (ИЦТ).
Материал и методы. Фенотип лимфоцитов периферической крови определяли через две недели после иммунизации (на 18–20-й день менструального цикла) у 52 пациенток с привычным выкидышем вне беременности и у 15 фертильных женщин контрольной группы.
Результаты исследования. В процессе проведения двух циклов ИЦТ выявлены изменения в содержании лимфоцитов с киллерной функцией и фенотипом CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, CD3+CD16+, а также увеличение абсолютного содержания лимфоцитов с фенотипом CD5+CD19+. Не было выявлено изменений в содержании основных субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD19+), клеток, экспрессирующих молекулу CD200, Т-регуляторных клеток.
Заключение. Перспективы дальнейших исследований связаны с изучением маркеров активационного состояния лимфоцитов различных субпопуляций.

Ключевые слова

привычное невынашивание беременности
привычный выкидыш
предгестационная подготовка
иммуноцитотерапия
фенотип лимфоцитов периферической крови
CD200
Т-регуляторные клетки

Привычная потеря беременности ранних сроков (привычный выкидыш) – диагноз, который, согласно определению ВОЗ, устанавливается в случае произошедших подряд трех и более самопроизвольных прерываний беременности на сроке гестации до 22 недель (код N96 по МКБ-10). Установлено, что женщины с привычным выкидышем на ранних сроках гестации составляют группу риска, в которой существенно повышена вероятность развития плацентарной недостаточности, наступления ранних преждевременных родов, задержки роста плода, излития околоплодных вод при недоношенном сроке беременности, отслойки плаценты во втором и третьем триместрах беременности [1, 2].

Ключевую роль в развитии привычного выкидыша неясного генеза, или идиопатического привычного выкидыша (от 5 до 20% в структуре невынашивания), играют аллоиммунные нарушения [3].

По данным зарубежных авторов, шанс доносить беременность без терапии после трех выкидышей, обусловленных аллоиммунными механизмами, составляет 30%, после четырех – 25%, после пяти – 5% [4, 5].

Поэтому в настоящее время наличие даже двух последовательных выкидышей рассматривается как основание для постановки диагноза «привычный выкидыш», последующего обязательного обследования, в том числе и иммунологического, и оптимизации подготовки к беременности [6].

Показано, что иммуноцитотерапия (ИЦТ) – введение аллогенных лимфоцитов с целью иммунизации женщин с привычным выкидышем при подготовке к беременности (особенно в супружеских парах с совместимостью по HLA-антигенам) способствует формированию состояния иммунной системы, необходимого для успешной имплантации, а во время беременности – для стимуляции развития плаценты и обеспечения нормального развития эмбриона [7, 8].

ИЦТ широко используется для коррекции привычного невынашивания беременности как в России [9, 10], так и за рубежом [11, 12], однако механизмы влияния аллоиммунизации на имплантацию и последующую гестацию остаются неизученными.

Долгое время считалось, что одним из результатов иммунотерапии является подавление агрессивных эффекторных реакций материнской иммунной системы, выражающееся в снижении содержания субпопуляций клеток с естественной киллерной активностью и в продукции блокирующих антител.

Особую значимость в последнем десятилетии приобрели исследования субпопуляции Т-регуляторных клеток с фенотипом CD4+CD25+ и конститутивной экспрессией фактора Foхр3+ (Трег). Считается, что осуществляемая Трег специфическая иммуносупрессия, способствует формированию состояния толерантности, необходимого для реализации гестационных процессов в первом триместре беременности [13]. В связи с этим обсуждается точка зрения, что целью иммунотерапии должна быть не иммуносупрессия, а стимуляция толерантности к аллоантигенам плода отцовского происхождения [14].

Показано, что важная роль в иммунорегуляции принадлежит толерогенной молекуле СD200. В результате взаимодействия CD200 с рецепторами как дендритных клеток, так и клеток с естественной киллерной активностью индуцируется секреция индоламиндиоксигеназы, и они приобретают способность посредством продукции ТФР-β (трансформирующего фактора роста-β) стимулировать генерацию Трег клеток и, соответственно, индуцировать формирование специфической периферической толерантности [15–18].

Исследований, посвященных одновременной оценке особенностей субпопуляций с киллерной активностью, Трег и клеток, несущих CD200, на фоне предгестационной ИЦТ не проводилось.

Целью настоящей работы стало исследование динамики субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови, включая субпопуляции киллерных клеток с различным фенотипом, естественных Трег и клеток, экспрессирующих CD200, в процессе предгестационной ИЦТ женщин с привычным выкидышем аллоиммунного генеза.

Материал и методы исследования

Основную группу исследования составили 52 женщины с двумя и более потерями беременности от одного партнера в анамнезе (если в каждом случае был подтвержден нормальный кариотип плода), произошедшими в первом триместре беременности.

Критериями включения женщин в исследование были: подписание формы информированного согласия на участие в исследовании, возраст женщины от 20 до 40 лет, самопроизвольное наступление беременности, нормальный кариотип обоих партнеров, нормозооспермия у партнера, отсутствие анатомических, генетически обусловленных, аутоиммунных, гормональных нарушений, препятствующих наступлению и вынашиванию беременности, отсутствие тяжелых экстрагенитальных заболеваний.

В контрольной группе были обследованы вне беременности 15 фертильных женщин без соматических заболеваний с неотягощенным акушерско-гинекологическим анамнезом, имеющие одного ребенка не старше 2 лет или более одного ребенка, последний из которых не старше 2 лет.

В качестве подготовки к беременности женщинам с привычным выкидышем была назначена процедура ИЦТ – иммунизация аллогенными клетками партнеров, которую проводили дважды с интервалом в один месяц на 5–9-й день менструального цикла. При этом пациенткам подкожно вводили 50 млн клеток лейкоцитарной взвеси партнера в ладонную поверхность предплечья в 10–12 точек.

Кровь у женщин для анализа забирали натощак из локтевой вены до иммунизации и после каждого введения клеток на 18–22-й день менструального цикла.

Поверхностный фенотип клеток периферической крови определяли с помощью стандартного набора моноклональных антител, меченных флуоресцеин-изотиоцианатом (FITC) или фикоэритрином (PE), против антигенов CD3, CD4, CD5, CD8, CD16, CD19, CD16, CD56, CD200 (Becton Dickinson и eBioscience, США). Оценивали содержание основных субпопуляций иммунокомпетентных T-клеток (СD3+, CD4+, CD8+), В-клеток (CD19+), B1-клеток (CD19+CD5+), NK-клеток (СD56+, СD16+), а также содержание Трег (СD4+CD25highCD127low/-). Лимфоцитарный гейт, позволяющий исключить из анализа другие клетки крови, выявляли с помощью моноклональных антител к СD45, меченных перидинин-хлорофилл протеином (Per-CP) (Dako, Дания). Для оценки процентного содержания Трег использовали набор, содержащий моноклональные антитела к антигенам CD4, меченые Per-CP (eBioscience, США), CD25, меченые FITC (Becton Dickinson, США) и СD127, меченые PE (eBioscience, США). Моноклональные антитела добавляли непосредственно к цельной крови, затем лизировали с помощью раствора FACS Lysing Solution (Becton Dickinson, США). Анализ проводили с использованием проточного цитофлуориметра FACSСalibur (Becton Dickinson, США).

Статистическую обработку данных производили общепринятыми методами вариационной статистики. Данные представлены как среднее±ошибка среднего. Соответствие расчетных выборок показателей нормальному распределению оценивали с помощью критерия Колмогорова–Смирнова с использованием пакета Statistica 6 для Windows XP.

Значимость наблюдаемых отклонений средних значений измеренных параметров оценивали с помощью двухвыборочного t-критерия Стьюдента с различными дисперсиями для средних значений с использованием пакета статистического анализа для Microsoft Office Excel 2007.

Результаты исследований

Было проанализировано содержание лимфоцитов различных фенотипов в периферической крови женщин с привычным выкидышем до назначения лечения и после каждой процедуры аллоиммунизации. Результаты исследования представлены в таблице.

Из таблицы следует, что двукратная аллоиммунизация существенно не влияла на содержание основных субпопуляций лимфоцитов, за исключением некоторых колебаний в содержании субпопуляций клеток с цитотоксической функцией. После первой процедуры значимо уменьшилось содержание лимфоцитов с фенотипом CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, а в содержании лимфоцитов с фенотипом CD3+CD16+ была отмечена тенденция к уменьшению (р=0,066). После 2-й процедуры содержание лимфоцитов с фенотипом CD56+ и с фенотипом CD3-CD56,16+ вернулось к исходным значениям, содержание лимфоцитов с фенотипом CD56,16+ осталось меньшим по сравнению с исходными значениями, а содержание лимфоцитов с фенотипом CD3+CD16+ увеличилось по сравнению с уровнем после первой процедуры, но без отличий от исходного уровня.

В предыдущих исследованиях нами было показано, что содержание лимфоцитов различных фенотипов различается у женщин с привычным выкидышем и здоровых [19]. Сравнение динамики субпопуляций лимфоцитов женщин с привычным выкидышем в процессе предгестационной подготовки и содержания лимфоцитов в крови женщин контрольной группы отражено на рисунке.

При проведении иммунизации не менялись выявленные до ее начала отличия в содержании основных субпопуляций Т-лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD19+), лимфоцитов с киллерной функцией (CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, CD3+CD16+) и регуляторных клеток от нормативных значений. Лишь относительное содержание субпопуляций клеток с фенотипом CD3+CD56,16+ стало сходным с содержанием в контрольной группе после первой процедуры иммунизации. Однако после 2-й процедуры аллоиммунизации различия с контролем восстановились. Такая же динамика была выявлена при оценке абсолютного содержания лимфоцитов с фенотипом CD56,16+.

Обнаружено также, что после иммунизации увеличилось по сравнению с контролем абсолютное содержание B1-лимфоцитов с фенотипом CD5+CD19+.

Обсуждение

ИЦТ имеет не менее чем 30-летнюю историю применения и исследования ее механизмов. Однозначного вывода об ее эффективности не сделано до настоящего времени, поскольку протоколы иммунизации в различных клиниках мирового сообщества отличаются друг от друга, как и показатели, используемые для оценки ее влияния на состояние иммунной системы [3, 20–22].

Существует точка зрения, согласно которой механизм реализации выкидыша неясной этиологии аналогичен реакциям острого отторжения чужеродного трансплантата [3, 22]. Поскольку ключевая роль в реакциях отторжения принадлежит клеточным иммунным реакциям, то перспективы диагностики иммунных нарушений при привычном выкидыше и перспективы поиска маркеров эффективности иммунотерапии традиционно связывают с оценкой содержания в периферической крови субпопуляций клеток с естественной киллерной активностью.

Ранее было установлено, что иммунизация клетками полового партнера женщин с привычным выкидышем на самых ранних стадиях первого триместра приводит к снижению содержания киллерных клеток с фенотипом CD56+, что ассоциировалось с успехом этой процедуры в лечении привычного выкидыша [9, 23, 24].

На основании этих данных было высказано предположение, что проведение аллоиммунизации не только во время беременности, но и при подготовке к беременности женщин с привычным выкидышем будет способствовать успешному протеканию процессов имплантации и дальнейшему развитию беременности.

Предварительные клинические наблюдения позволили создать протокол «Подготовка и ведение беременности при аллоиммунных нарушениях», в котором рекомендуется проведение ИЦТ пациенткам до беременности в двух циклах с контролем содержания лимфоцитов с киллерной функцией [25]. В представленной работе использовалась схема проведения ИЦТ, предложенная в указанном протоколе.

Нами показано, что после первой процедуры иммунизации наблюдалось значимое снижение содержания клеток с цитотоксической функцией и фенотипом CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, и тенденция к снижению содержания лимфоцитов с фенотипом CD3+CD16+. После второй иммунизации сниженным осталось только содержание лимфоцитов с фенотипом CD56,16+, содержание остальных киллерных субпопуляций не отличалось от исходного уровня. При этом отличия содержания перечисленных субпопуляций от контроля, выявленные до иммунизации, после двукратной иммунизации не изменились.

Также в результате двух последовательных процедур иммунизации не было выявлено значимых изменений в содержании основных субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD19+), Трег и экспрессии CD200.

До настоящего времени нет однозначного мнения об изменениях в субпопуляционном составе лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем после аллоиммунизации. Противоречивы результаты оценки содержания в периферической крови клеток с киллерной функцией [26, 27]. Показано как отсутствие изменений в содержании Трег [28], так и повышение их содержания при аллоиммунизации [29].

Причиной отличий полученных результатов могут быть как отсутствие стандартных протоколов иммунизации, так и методические особенности, связанные с подготовкой периферической крови женщин к анализу. В ранее проведенных исследованиях была использована фракция мононуклеарных клеток периферической крови, полученная с помощью сепарации крови в градиенте плотности различных сред. Существенным отличием нашей работы является использование цельной крови, исключающее избирательную потерю отдельных субпопуляций лимфоцитов, а также оптимизированной схемы фенотипирования лимфоцитов [30].

В представленной работе обнаружено значимое увеличение абсолютного содержания В1-лимфоцитов с фенотипом CD5+CD19+, что может свидетельствовать о влиянии иммунизации на состояние гуморального иммунитета.

Известно, что большинство антител, секретируемых В1-лимфоцитами, специфично к собственным белкам организма (ДНК, антигенам групп крови и др.) и многие из них полиреактивны. В норме эти антитела имеют низкое сродство к антигенам, включая аутоантигены, и не способны вызывать повреждение тканей.

Признаком активации В-клеточного звена иммунитета является также появление антиотцовских антилейкоцитарных антител в крови пациенток после иммунизации [22, 31].

Таким образом, нельзя исключить, что иммунизация влияет на состояние активации лимфоцитов основных субпопуляций, что, в свою очередь, может определять функциональные особенности Трег [15, 16].

Очевидно, что перспективы изучения влияния процедур иммунизации пациенток с привычным выкидышем клетками полового партнера в предгестационной подготовке на состояние иммунной системы связаны с исследованием маркеров активационного состояния лимфоцитов различных субпопуляций, а также с контролем продукции аутоантител и антиотцовских антител, что явится предметом наших дальнейших исследований.

Заключение

В процессе предгестационной подготовки проведена двукратная иммунизация клетками полового партнера 52 женщин с привычным выкидышем аллоиммунного генеза. Выявлены изменения в содержании лимфоцитов с киллерной функцией и фенотипом CD56+, CD3-CD56,16+, CD56,16+, CD3+CD16+, а также увеличение абсолютного содержания лимфоцитов с фенотипом CD5+CD19+. Значимой динамики основных субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+, CD19+), клеток, несущих CD200, Трег не обнаружено. Перспективы дальнейших исследований связаны с изучением маркеров активационного состояния лимфоцитов различных субпопуляций.

Список литературы

  1. Saraswat L., Bhattacharya S., Maheshwari A., Bhattacharya S. Maternal and perinatal outcome in women with threatened miscarriage in the first trimester: a systematic review. Br. J. Obstet. Gynaecol. 2010; 117(3): 245-57.
  2. Van Oppenraaij R.H., Jauniaux E., Christiansen O.B., Horcajadas J.A., Farquharson R.G., Exalto N.; ESHRE Special Interest Group for Early Pregnancy (SIGEP). Predicting adverse obstetric outcome after early pregnancy events and complications: a review. Hum. Reprod. Update. 2009; 15(4): 409-21.
  3. Carp Howard J.A., ed. Recurrent pregnancy loss: causes, controversies and treatment. Informa UK ltd.; 2007. 290p.
  4. Chong P.J., Matzner W.L., Ching W.T. Benefit of leukocyte immunizations? Fertil. Steril. 1993; 59(1): 247-9.
  5. Chong P.J., Matzner W.L., Ching W.T. Controversy about immunotherapy. Fertil. Steril. 1993; 59(5): 1138-9.
  6. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т. Невынашивание беременности. Руководство для практикующих врачей. М.: МИА; 2011. 516с.
  7. Сухих Г.Т., Ванько Л.В. Иммунология беременности. М.: Издательство РАМН; 2003. 400с.
  8. Посисеева Л.В., Малышкина А.И., Бойко Е.Л., Сотникова Н.Ю., Перетятко Л.П., Фетисова И.Н. Реабилитация репродуктивного здоровья супружеских пар с невынашиванием беременности. Иваново: Изд-во Иваново; 2008. 240с.
  9. Петросян Л.А. Оптимизация лимфоцитоиммунотерапии в лечении привычной потери беременности первого триместра: автореф. дисс. … канд. мед. наук. М.; 2009. 24с.
  10. Khonina N.A., Broitman E.V., Shevela E.Y., Pasman N.M., Chernykh E.R. Mixed lymphocyte reaction blocking factors (MLR-Bf) as potential biomarker for indication and efficacy of paternal lymphocyte immunization in recurrent spontaneous abortion. Arch. Gynecol. Obstet. 2013; 288(4): 933-7.
  11. Nonaka T., Takakuwa K., Ooki I., Akashi M., Yokoo T., Kikuchi A., Tanaka K. Results of immunotherapy for patients with unexplained primary recurrent abortions – prospective non-randomized cohort study. Am. J. Reprod. Immunol. 2007; 58(6): 530-6.
  12. Recurrent Miscarriage Immunotherapy Trialists Group. Worldwide collaborative observational study and meta-analysis on allogenic leukocyte immunotherapy for recurrent spontaneous abortion. Am. J. Reprod. Immunol. 1994; 32(3): 55-72.
  13. Saito S., Shima T., Nakashima A., Shiozaki A., Ito M., Sasaki Y. What is the role of regulatory T cells in the success of implantation and early pregnancy? J. Assist. Reprod. Genet. 2007; 24(9): 379-86.
  14. Williams Z. Inducing tolerance to pregnancy. N. Engl. J. Med. 2012; 367(12): 1159-61.
  15. Vacca P., Cantoni C., Vitale M., Prato C., Canegallo F., Fenoglio D. et al. Crosstalk between decidual NK and CD14+ myelomonocytic cells results in induction of Tregs and immunosuppression. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010; 107(26): 11918-23.
  16. Trabanelli S., Ocadlikova D., Evangelisti C., Parisi S., Curti A. Induction of regulatory T cells by dendritic cells through indoleamine 2,3-dioxygenase: a potent mechanism of acquired peripheral tolerance. Curr. Med. Chem. 2011; 18(15): 2234-9.
  17. Clark D.A., Wong K., Banwatt D., Chen Z., Liu J., Lee L. et al. CD200-dependent and nonCD200-dependent pathways of NK cell suppression by human IVIG. J. Assist. Reprod. Genet. 2008; 25(2-3): 67-72.
  18. Clark D.A. Cell-surface CD200 may predict efficacy of paternal mononuclear leukocyte immunotherapy in treatment of human recurrent pregnancy loss. Am. J. Reprod. Immunol. 2009; 61(1): 75-84.
  19. Кречетова Л.В., Хачатрян Н.А., Тетруашвили Н.К., Вторушина В.В., Степанова Е.О., Николаева М.А., Сухих Г.Т. Особенности фенотипа лимфоцитов периферической крови женщин с привычным выкидышем. Акушерство и гинекология. 2014; 10: 27-33.
  20. Porter T.F., LaCoursiere Y., Scott J.R. Immunotherapy for recurrent miscarriage. Cochrane Database Syst. Rev. 2006; (2): CD000112.
  21. Duckitt K., Qureshi A. Recurrent miscarriage. BMJ Clin. Evid. 2011; 2011: pii: 1409.
  22. Farquharson R.G., Stephenson M.D., eds. Early pregnancy. Cambridge University Press; 2012. 308p. Available at: http://ebooks.cambridge.org/
  23. Szpakowski A., Malinowski A., Cieslak J., Nowak M., Wilczyński J.R., Banasik M. et al. The influence of paternal lymphocyte immunization on the selected subpopulations of peripheral blood lymphocytes in women with recurrent spontaneous abortion of unknown etiology. Ginekol. Pol. 2003; 74(4): 288-96.
  24. Патент РФ 2283653. Способ лечения невынашивания беременности. Сидельникова В.М., Сухих Г.Т., Кирющенков П.А., Верясов В.Н.; Заявка № 2004111829; Заявлено 209.04.2004; Опубл. 20.6.2006; Бюл. 26.
  25. Сидельникова В.М. Подготовка и ведение беременности у женщин с привычным невынашиванием. Методические пособия и клинические рекомендации. М.: МЕДпресс-информ; 2011с. 224с.
  26. Tang A.W., Alfirevic Z., Quenby S. Natural killer cells and pregnancy outcomes in women with recurrent miscarriage and infertility: a systematic review. Hum. Reprod. 2011; 26(8): 1971-80.
  27. Takeshita T. Diagnosis and treatment of recurrent miscarriage associated with immunologic disorders: Is paternal lymphocyte immunization a relic of the past? J. Nippon Med. Sch. 2004; 71(5): 308-13.
  28. Liang P., Mo M., Li G.G., Yin B., Cai J., Wu T. et al. Comprehensive analysis of peripheral blood lymphocytes in 76 women with recurrent miscarriage before and after lymphocyte immunotherapy. Am. J. Reprod. Immunol. 2012; 68(2): 164-74.
  29. Yang H., Qiu L., Di W., Zhao A., Chen G., Hu K. et al. Proportional change of CD4+CD25+ regulatory T cells after lymphocyte therapy in unexplained recurrent spontaneous abortion patients. Fertil. Steril. 2009; 92(1): 301-5.
  30. Степанова Е.О., Николаева М.А., Ходжаева З.С., Кречетова Л.В., Зиганшина М.А., Бабаян А.А. и др. Сравнение двух способов фенотипирования лимфоцитов периферической крови у пациенток с невынашиванием беременности. Российский аллергологический журнал. 2012; 1: 296-7.
  31. Krechetova L.V., Nikolaeva M.A., Van’ko L.V., Ziganshina M.M., Golubeva E.L., Stepanova E.O. et al. Optimal detection of serum antipaternal antileukocytic antibodies after injection of allogenic lymphocytes in woman with habitual abortions. Bull. Exp. Biol. Med. 2012; 153(5): 726-9.

Об авторах / Для корреспонденции

Кречетова Любовь Валентиновна, к.м.н., с.н.с., зав. лабораторией клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: k_l_v_@mail.ru
Степанова Елена Олеговна, м.н.с. лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (962) 954-44-21. Е-mail: elena2404.07@mail.ru
Николаева Марина Аркадьевна, д.б.н., в.н.с. лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: nikolaeva_ma@mail.ru
Вторушина Валентина Валентиновна, к.м.н., врач клинической лабораторной диагностики ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: vtorushina@inbox.ru
Голубева Елена Львовна, к.м.н., врач-лаборант лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: e_golubeva@oparina4.ru
Хачатрян Нелли Артуровна, аспирант, 2-е отделение акушерское патологии беременности ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-77. E-mail: nelly1986@mail.ru
Тетруашвили Нана Картлосовна, д.м.н., профессор, зав. 2-м отделением акушерским патологии беременности ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: n_tetruashvili@oparina4.ru
Сухих Геннадий Тихонович, академик РАН, д.м.н., профессор, заслуженный деятель науки РФ, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-00. E-mail: gtsukhikh@mail.ru

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.