Но далеко не всегда перенос эмбриона даже хорошего качества в полость матки в соответствующей фазе менструального цикла приводит к наступлению беременности.
В этиологии неудач имплантации и ранних репродуктивных потерь беременности они называют прежде всего хромосомные аномалии эмбрионов. И более половины этих неудач ассоциированы с анеуплоидностью клеток эмбриона (увеличение набора хромосом, не кратное гаплоидному).
Частота образования эмбрионов с хромосомными аномалиями напрямую связана с возрастом женщины: доля анеуплоидных эмбрионов у 26—30-летних составляет 20—27%, у 45-летних – 95,5%. Учитывая, что многие современные женщины откладывают материнство на более поздние сроки, проблема анеуплоидных эмбрионов приобретает критически важное значение, как и возможность выявления хромосомных аномалий на доимплантационном этапе.
Используемые сегодня в клинической практике визуальные методы оценки качества эмбрионов не отражают их хромосомный статус (около 44,5% анеуплоидных бластоцист имеют нормальное морфологическое строение) и не исключают переноса такого эмбриона в полость матки.
По мнению авторов статьи, опубликованной в журнале «Акушерство и гинекология», № 11, одно из наиболее перспективных направлений репродукции — изучение роли посттранскрипционных регуляторов экспрессии кодирующих белок генов в эмбриогенезе и возможности использования их в качестве биомаркеров качества эмбрионов. Среди таких маркеров основное место могут занимать piwiРНК, представляющие малые некодирующие РНК. Их отличительной особенностью ученые называют регуляцию стабильности генома клетки путем подавления активности мобильных генетических элементов – транспозонов.
Ученые из Национального медицинского исследовательского центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова обратили внимание на возможную роль piwiРНК как маркера плоидности клеток эмбриона для выбора наиболее качественной бластоцисты для переноса в полость матки. Целью исследования стал анализ содержания piwiРНК в среде культивирования бластоцисты с охарактеризованным кариотипом по данным ПГТ-А для идентификации молекул, ассоциированных с плоидностью клеток эмбриона, и оптимизации селективного переноса эмбриона в рамках программ ВРТ.
В исследовании приняли участие 73 супружеские пары, у которых была проанализирована среда культивирования 93 эмбрионов. В их число вошли 53 эуплоидные бластоцисты (по результатам ПГТ-А) с наличием (27 эмбрионов) и отсутствием (26 эмбрионов) имплантации после криопереноса в полость матки в программах ВРТ с использованием циклической гормональной терапии, а также 40 анеуплоидных бластоцист. |
Молекулы piwiРНК, выделенные из 20 мкл среды культивирования (набор «miRNeasy Serum/Plasma Kit», Qiagen), были проанализированы (метод глубокого секвенирования на платформе NextSeq 500/550, Illumina) c последующей валидацией полученных данных методом количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Авторы получили две модели логистической регрессии по количественной оценке (hsa_piR_020497 и hsa_piR_020829 и hsa_piR_016677 и hsa_piR_020829), обладающие 93 и 100%-ной специфичностью соответственно, при идентификации эуплоидной бластоцисты с высоким имплантационным потенциалом. Используя алгоритм miRanda, они проанализировали потенциальные гены-мишени молекул piwiРНК, ассоциированные с анеуплоидией клеток и участвующие в формировании веретена деления, образовании и функционировании кинетохора, цитокинезе.
Таким образом был разработан неинвазивный метод отбора эуплоидного эмбриона с высоким имплантационным потенциалом для переноса в полость матки в программах ВРТ. Исследователи уточнили, что их метод на данном этапе исследования является вспомогательным, но не альтернативным методу ПГТ-А.